實驗材料 細菌
試劑、試劑盒 胰化蛋白胨酵母提取物氯化鈉NaOH
儀器、耗材 培養瓶玻璃棒離心管搖床
實驗步驟
1. 在3個無菌培養試管中各加人5 ml LB培養液，并標上序號1、2、3。
2. 吸取5 μl 細菌培養液加入1號試管中振蕩揺勻。
3. 接著從1號試管吸5 μl 稀釋液加入 2號試管振蕩搖勻。
4. 從2號試管吸5 μl 稀釋液加入3號試管振蕩搖勻，每次都使用新的吸頭。
5. 從每個試管中分別取100 μl 菌液涂布于LB平皿上，并且做好記號，待平板干后于 37℃培養。
6. 計算每亳升細菌細胞數：細菌細咆數/ml=10×菌落數×稀釋倍數。
7. 包裹好平板保存于4℃以備進一步實驗用。
實驗材料 細菌
儀器、耗材 接種環培養皿
實驗步驟
一、實驗準備
1. 接種環
（1）滅菌，將接種環置于本生燈火焰中灼燒直至變紅。
（2）冷卻，將接種環觸碰無菌瓊脂平板的表面直至其不發出咝咝聲。
二、實驗步驟
1. 采用無菌操作技術，用接種環將接種物從平板的一側開始劃線。
2. 重新消毒接種環，從*劃線處將樣品劃線至平板的其佘部分，重復劃線直至覆蓋整個平板。
3. 于37℃培養直至長出單菌落。
4. 如果要從很多的菌液中分離單克隆，可以將平 板分為4、6或8小份，在每個小份中劃出單克隆。
實驗材料 細菌
儀器、耗材 涂布棒培養箱培養皿
實驗步驟
一、實驗準備
1. 涂布棒
（1）加熱并彎曲一支直徑4 mm 的玻璃管或巴斯德吸管制備涂布棒。
（2）滅菌，將涂布棒的三角部分浸沒于酒精中，從容器中取出后再通過燈焰，點燃其上的乙醇。
（3）待涂布棒上的火焰熄滅后，將其觸碰無菌瓊脂平板的表面使其冷卻。
二、實驗步驟
1. 吸取0.05~1 ml 培養物至一只干的平板上。
2. 用涂布棒作圓周運動將培養液涂布均勻，或用涂布棒的邊緣在平板的表面劃光柵圖案 （一系列平行線）然后轉動平板并與已涂布的平行線成直角重復涂布。
3. 平板蓋微開至平板*晾干，于37℃培養。
