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蛋白質電轉實驗步驟

閱讀:175發布時間:2016-6-17

蛋白質電轉實驗步驟

1.  剪6塊3 MM 濾紙和一塊NC膜。

2.  將剪好的3 MM 濾紙和NC膜在轉移緩沖液中浸泡3-5分鐘。

3.  按下列過程安裝轉移裝置,將塑料支架平放在含轉移緩沖液的托盤中,在塑料支架上放一塊海綿。

4.  將3塊3MM濾紙對齊放在海綿上,然后依次將NC膜、凝膠、及另3塊慮紙和海綿放上。

5.  用塑料支架夾緊上述各層,放入電轉移槽內,NC膜一側向正極,凝膠一面向負極。

6.  接通電源電壓120 mA,轉移6小時以上或過夜。

7.  轉移結束后,取出塑料支架,依次取掉各層,用鉛筆在膜的上沿作好標記,切下其中一個孔所對應膜的一半,用氨基黑或考馬士亮蘭染色,檢查轉移效果。

8.  將其余的NC膜放在一張干凈的3 MM 濾紙上,室溫干燥30~60分鐘(可不做)。
1.  慮紙及膜的大小不應大于待轉移膠的大小,否則在轉移過程中會發生短路,影響轉移效果。

2.  操作中應戴手套,切不可用手直接觸摸,因手上的汗和分泌物將直接影響到蛋白從膠向膜的轉移。

3.  放置NC膜和濾紙時,每層之間不應有氣泡,否則將影響轉移效果。

4.  待轉移蛋白分子量決定轉移時間,分子量大,轉移時間長,反之則小。

蛋白質電轉實驗步驟


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