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上海彩佑實業有限公司
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閱讀:394發布時間:2015-8-7
實驗方法原理 在生活細胞內,原生質的活躍運動現象統稱為原生質運動。原生質運動是生活細胞的重要標志之一。原生質可以在細胞內流動,也可以通過胞間連絲穿流于細胞與組織之間,有時并非全部原生質都參與運動而于局部細胞質,往往原生質表面的透明層(Hyaloplasm)處于靜止狀態。
原生質運動在所有生活細胞中均可見,但往往在某些特定材料中表現得特別明顯。有時由于在制片時對材料的機械損傷,也會引起原生質發生強烈的運動。
原生質運動是生活體消耗能量而做功的生理過程,它與植物體內的物質運輸及分配以及多種酶促反應密切。原生質運動有各種形式,一般將原生質運動歸為兩類,凡并非因外界環境的改變而引起的原生質運動,稱為自發性的原生質運動;由于某種外界原因而引起的原生質運動稱為誘發性的原生質運動。
本實驗使用光學顯微鏡觀察幾種植物細胞原生質的運動現象;測定原生質運動的速度及觀察呼吸抑制劑2,4-二硝基酚(DNP)對原生質運動的影響。
實驗步驟
材料和設備
黑藻、輪藻、小麥幼苗(種子萌發2-3天根長1-2 cm )、紫鴨趾草(正在開花的)、洋蔥鱗莖(未萌發的紫皮鱗莖)、南瓜葉片表皮毛或莖部表皮毛、粘菌的原生質團、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、解剖針、鑷子、剪刀、紗布、擦鏡紙、目鏡測微尺、臺尺、秒表、濾紙。
5×10-4 M 的2,4-二硝基*溶液
實驗步驟
1.觀察幾種植物細胞的原生質運動現象。
(1)黑藻葉片的觀察:用鑷子取下黑藻幼嫩葉片放于載玻片上,滴加清水并蓋上蓋玻片,在顯微鏡下觀察,尋找沿葉片中脈的部分,細胞中葉綠體隨原生質沿胞壁移動(若室溫低于20℃或陰天看不見原生質運動現象時,可用強光照射15-20 分鐘后再觀察)。注意整個葉片中哪些部分原生質流動得zui快,相鄰兩細胞中流動方向有何不同。
(2)輪藻節間細胞的觀察,取一株粘藻(含有兩個以上的節)節間,用水洗凈后置于載玻片上,加蓋玻片于顯微鏡下觀察,由于輪藻節間外面常有沉積物附著不易看清,因此可先在低倍物鏡下移動載玻片,找到合適的部分后再換高倍物鏡觀察,細胞中排列整齊的葉綠體并不移動,而原生質透明部分夾帶著大小顆粒一起流動,小心地調動細螺旋仔細觀察。
(3)小麥根毛的觀察:將小麥根剪下放在載玻片上,加蓋玻片在低倍鏡下找到根尖以上的根毛區,然后在高倍鏡下進行鏡檢,可以看到透明原生質夾帶一些顆粒沿根毛細胞壁流動,注意根毛和基部原生質流動方向的變化。
(4)紫鴨跖草雄蕊毛的觀察:將正在開放或即將要開的紫鴨跖草的花剝開,用鑷子取下幾根雄蕊毛,在顯微鏡下觀察,可見細胞內的原生質以不固定的方向流動。
(5)洋蔥鱗莖內表皮的觀察:用鑷子撕取洋蔥鱗莖內表皮,在顯微鏡下觀察,可看到細胞中原生質的運動。
(6)輕輕取下南瓜葉片表皮或莖部表皮,置于載玻片上,滴上清水后蓋上蓋玻片,于鏡下進行鏡檢,可見原生質絲縱橫交錯地包在表面,原生質的運動可以其中小顆粒的位移作為指標。仔細觀察原生質的運動方向及其通過胞間連絲穿流于細胞的情況。
(7)觀察萌發的花粉管,可見原生質在花粉管中的環流現象。
2.測定原生質運動的速度
可以原生質中某些顆粒的移動速度作指標來測定原生質的運動速度。但原生質顆粒大小不一,它的移動速度亦異,因此應盡量選用較小的顆粒,進行多次測定,求出平均值。
先將目鏡測微尺裝入目鏡,將臺尺(一小格相當于0.1 mm即10 μm)置于載物臺上,求出目鏡測微尺每格相當于多少毫米(或微米),移去臺尺。將植物材料放在顯微鏡下用同一物鏡觀察。轉動目鏡,使其中的測微尺與原生質的流動方向平行,用秒表求出每走若干格(視植物材料而定)所需的時間,測10-20次求出平均值。
3.呼吸抑制劑DNP(2,4─二硝基酚)對原生質運動的影響
原生質運動需要消耗能量,這要靠呼吸作用來提供。DNP能抑制呼吸過程中磷酸化過程,因而也就抑制了原生質運動。
反復將5×10-4 M的DNP滴加在載玻片的一端,在另一端用濾紙片吸引,10-20 分鐘后,可見原生質流動減緩甚至停止。
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