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大鼠B細(xì)胞活化因子（BAFF）ELISA試劑盒

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卡邁舒化學(xué)技術(shù)（上海）有限公司專(zhuān)業(yè)研發(fā)銷(xiāo)售各種屬科研ELISA試劑盒,并提供無(wú)償代檢測(cè)服務(wù),是國(guó)內(nèi)多家科研機(jī)構(gòu)及高校的ELISA試劑盒專(zhuān)業(yè)供應(yīng)商,大鼠B細(xì)胞活化因子（BAFF）ELISA試劑盒質(zhì)量保證,*,發(fā)貨及時(shí),運(yùn)輸嚴(yán)格,產(chǎn)品得到諸多單位科研工作者的認(rèn)可與支持,更有專(zhuān)業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)用心為您的科研之路保駕護(hù)航,做您身邊的科研伴侶！

詳細(xì)介紹

名稱(chēng)：大鼠B細(xì)胞活化因子(BAFF)ELISA試劑盒

規(guī)格：48T/96T

原理：ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)

包括：人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚(yú)等等

標(biāo)本：血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。

樣品收集、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3. 細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

大鼠B細(xì)胞活化因子(BAFF)ELISA試劑盒操作流程如下：

（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。　（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。

（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿(mǎn)板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿(mǎn)板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。

（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。　

（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。　

（6）洗板，同（4）。　

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。　

（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。　

（9）洗板，同（4）。　

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。　

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。　

（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，zui終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。

注：所用溶液配方

(1) PBS：稱(chēng)取0.2g KH2P04, 2.9g Na2HP04?12H20、8.0g NaCl, 0.2g KCl，加雙蒸水至1000ml。

（2）包被緩沖液：稱(chēng)取1.59g Na2CO3, 2.938 NaHCO3，加雙蒸水至 1000m1。

（3）洗滌液(PBST)：含0.05% Tween-20的PBS。

（4）稀釋液：含0.1%牛血清白蛋白(BSA)的PBS，主要用以稀釋抗體、標(biāo)準(zhǔn)品、樣品。

（5）TMB顯色液：稱(chēng)取1.84g Na2HP04.12H20, 0.51 g檸檬酸，加雙蒸水至1O0ml，配成檸檬酸-磷酸緩沖溶液。用10.5 ml 檸檬酸-磷酸緩沖溶液溶解1錠TMB，再加入35μl 3% H2O2

（6）細(xì)胞裂解液：1% TritonX-100，137mmol/L NaCl，20mmol/L Tris-HCl，2mmol/L EDTA，1mmol/L PMSF，pH 7.4。（其中PMSF溶于異丙醇中，配成1O mmo/L，-20℃ 貯存?zhèn)溆谩１４鏃l件及有效期：

1.試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個(gè)月

卡邁舒（上海）生物科技有限公司/ Kmaels (Shanghai) biotechnology co., LTD主營(yíng)各種屬Elisa試劑盒，產(chǎn)品服務(wù)于生物科研領(lǐng)域。致力為中國(guó)生命科學(xué)研究領(lǐng)域的科研工作者提供高品質(zhì)產(chǎn)品，產(chǎn)品囊括細(xì)胞因子系列，內(nèi)分泌系列，特種蛋白系列，腫瘤以及自身免疫系列等多個(gè)優(yōu)勢(shì)系列。產(chǎn)品種類(lèi)齊全指標(biāo)上千萬(wàn)種，原料均采用進(jìn)口試劑，引進(jìn)國(guó)外生產(chǎn)工藝，質(zhì)量穩(wěn)定可靠，性?xún)r(jià)比高，深受廣大用戶(hù)的信賴(lài)。

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