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反相高效液相色譜法測定兔血清中5-氟*的濃度

閱讀:491發布時間:2020-5-26

  5-氟*在1957年合成,為嘧啶類的氟化物,屬于抗代謝抗腫瘤藥,對增殖性細胞有殺傷性作用。5-Fu是臨床zui常用的抗腫瘤藥之一,適用于消化道癌、乳腺癌、卵巢癌、宮jin癌、膀胱癌、肺癌、頭頸部癌等多種惡性腫瘤。近年來,有關5-Fu的研究相當廣泛和深入,由于5-Fu具有在機體內的代謝較快(半衰期僅為15-20min)、個體差異大的特點,因此,一個可靠、簡便、快速、靈敏的濃度分析方法在5-Fu的基礎研究和臨床應用中均具有重要的作用。

   目前,國內外應用反相液相色譜方法分析5-Fu的報道有許多,但各自均具有定量下限濃度較高(范圍在30-2000μg/L)、內源物干擾大、易造成柱效降低,樣品分析時間長等缺點。因此,我們在文獻的基礎上進行了探索和改進,建立了反相高效液相色譜法測定微量5-氟*兔血清濃度的方法,本方法可靠、重復性好,在5-80μg/L范圍內呈良好的線性關系,具有特異性強、靈敏、精密度與準確度高等特點,可滿足5-氟*藥代動力學研究的要求。

儀器準備

 

儀器簡介

    LC-600A智能全控液相色譜系統由P600高壓恒流泵與UV600紫外檢測器直接構成等度分析系統。使用WS600工作站可以同時控制數臺P600高壓恒流泵、UV600紫外檢測器及恒溫柱箱等,實行多元高壓洗脫、波長掃描等功能。

 

應用領域

化合物檢測、法醫毒物分析、蛋白質組學食品檢測、藥物分析、環境分析、聚合物分析

 

譜條件:

 

色譜柱

 Kromasil-C18柱,(4.6mm×250mm ,5μm)

流動相

20mM醋酸銨/乙腈(98.2:1.8,pH=8.05)

紫外檢測波長

270nm

進樣量

20μL

流速

0.8mL/min

 

樣品處理方法:

 

用精密移液器吸取血漿樣本200μL于10mL離心管中,加入乙酸乙酯/異丙醇(84:16)萃取液3mL,渦旋2min,3500r/min離心15min;取上清液于0.45μm有機微孔濾膜過濾后,濾液于56℃水浴中氮氣吹干;干燥后加入100μL流動相溶解,進樣20μL分析

 

譜圖分析:


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