ELISA試劑盒在處理血清時應注意血清的三大特點：
1. 瓶裝(500ml) 血清解凍步驟(逐步解凍法): -20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以50 ml 無菌離心管可分裝40～45 ml。在溶解過程中須規則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發生。ELISA試劑盒勿直接由–20℃直接至37℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發生沈淀。

2.heat-inactivation 是指56℃, 30 分鐘加熱已*解凍之血清。加熱過程中須規則搖晃均勻。此熱處理之目的是使血清中之補體成份(complement) 去活化。除非必須，一般不建議作此熱處理，因為會造成沈淀物之顯著增多，且會影響血清之品質。補體參與之反應有：cytolytic activities, contraction of smooth muscle, release of histamine from mast cells and plaets, enhanced phagocytosis, chemotaxis and activation of lymphocytic and macrophage cell type。

3. 血清必須貯存于–20 ～ -70℃，若存放于4℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一 瓶，可將40～45 ml分裝于無菌50 ml 離心管中，由于血清結凍時體積會增加約10 %，ELISA試劑盒 必須預留此膨脹體積之空間，否則易發生污染或容器凍裂之情形。

ELISA試劑盒實驗注意事項：
一.  請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數（×n×5）。
二． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
三． 底物請避光保存。
四． 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
五． 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
六． ELISA試劑盒不同批號組分不得混用。

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