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ELISA試劑盒試驗重復性差的原因剖析

閱讀：377發布時間：2017-10-12

1、ELISA試劑盒樣品數量不一，加樣時間長短不一
解決方法： 重復某一樣品時，加樣時間盡可能與*次接近
2、ELISA試劑盒樣品加入后未混勻
解決方法： 加樣后在混勻器上充分混勻
3、酶標儀濾光片不對或輸入波長不對
解決方法：TMB顯色用450/630波長
4、酶標儀測定重復性差
解決方法：校對酶標儀
5、洗滌不正確
解決方法：洗滌液注滿各孔但不要溢出。洗板時反應板面向下，垂直用力甩凈內容物（可多甩幾次），在干凈、無或少塵的吸水材料上拍干。洗板機洗板時不應有堵孔，洗滌應充分 
6、溫育條件不一致（一次用水育，一次用恒溫箱） 
解決方法：恒溫箱溫育較水浴顯色深， OD值高出0.1-0.15,均采用恒溫箱.如用水浴水溫應控制在37℃ 
7、不慎多加或少加酶或顯色劑 
解決方法：多加時顯色深，少加則淺，用記號筆圈上，便于分析 
8、閾值附近時陰時陽 
解決方法：同一樣品做三個復孔，以二個（含二個以上相同結果為準） 
9、ELISA試劑盒加樣量不足、保溫時間、洗滌條件一致 
盡可能使用同一移液器和裝緊吸嘴重復測定標本。條件、人員等應盡量與上次保持一致
 


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