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技術(shù)文章

ELISA試劑盒均應(yīng)平衡至室溫

閱讀:192發(fā)布時(shí)間:2016-2-18

生物科技有限公司主營(yíng)產(chǎn)品,公司專業(yè)從事生物實(shí)驗(yàn)新產(chǎn)品研發(fā)與銷售、技術(shù)咨詢與服務(wù)為一體的高科技企業(yè)。是國(guó)內(nèi)生物試劑研發(fā)與生產(chǎn),銷售合為一體的創(chuàng)新型企業(yè),產(chǎn)品應(yīng)用在分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、儀器儀表等多個(gè)研究及應(yīng)用領(lǐng)域。ELISA試劑盒主要產(chǎn)品有生化試劑(進(jìn)口國(guó)產(chǎn))、培養(yǎng)基、動(dòng)物血清、抗原、抗體、實(shí)驗(yàn)試劑、Elisa試劑盒、實(shí)驗(yàn)室儀器等等。下面有關(guān)Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)的操作步驟簡(jiǎn)單給大家介紹下:
 實(shí)驗(yàn)開始前,試劑均應(yīng)平衡至室溫,試劑不能直接在37℃溶解;試劑或樣品配制時(shí),均需充分混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50?l,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40?l,然后再加待測(cè)樣品10?l(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,Elisa試劑盒盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50?l,空白孔除外。

顯色:每孔先加入顯色劑A50?l,再加入顯色劑B50?l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.終止:每孔加終止液50ml,終止反應(yīng)此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。

測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后分鐘以內(nèi)進(jìn)行。以上Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)操作步驟僅供大家參考。

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