脂肪酸代謝系列_肝脂酶(HL)測(cè)試盒_微量法
測(cè)定方法:微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣
注 意 :正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義:
肝酯酶是脂肪分解酶,在肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞中合成,存在于肝臟竇周間隙內(nèi)皮細(xì)胞表面和竇周間隙腔面的肝細(xì)胞微絨毛表面,可促進(jìn)脂蛋白中的TC向類(lèi)固醇激素轉(zhuǎn)化,血漿中的HL活性增高時(shí),血漿中小顆粒可導(dǎo)致LDL水平升高,加速動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生。
脂肪酸代謝系列_肝脂酶(HL)測(cè)試盒_微量法
測(cè)定原理:
肝酯酶水解α-乙酸萘酯產(chǎn)生α-萘酚,可與固藍(lán)B鹽形成紫紅色偶氮化合物,在595nm有特征吸收峰,顏色深淺在一定范圍內(nèi)與肝酯酶活性成正相關(guān)。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、冷凍離心機(jī)、研缽、水浴鍋、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板。
試劑組成和配制 :
試劑一:液體110mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體1mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑三:液體8mL×1瓶,4℃保存。
試劑四:液體1mL×1瓶,4℃避光保存。
樣品處理:
1.組織:按照質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g,加入1mL試劑一)加入試劑一,冰浴勻漿后于4℃,10000g離心10min,取上清待測(cè)。
2.細(xì)胞:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL試劑一)加入試劑一,冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后于4℃,10000g離心10min,取上清待測(cè)。
3.血清:直接測(cè)定。