己糖激酶(HK)測試盒_糖酵解系列_分光光度法
測定方法：分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣
注 意 ：正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義：
HK（EC 2.7.1.1）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，是葡萄糖分解過程中的個關鍵酶，催化葡萄糖轉化為6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖是糖酵解和磷酸戊糖途徑的交叉點。
測定原理：
HK催化葡萄糖合成6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖脫氫酶進一步催化6-磷酸葡萄糖脫氫生成NADPH，NADPH在340nm有特征吸收峰。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
己糖激酶(HK)測試盒_糖酵解系列_分光光度法
試劑的組成和配制：
提取液：60mL×1瓶，4℃保存；
試劑一：液體30mL×1瓶， 4℃保存；
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存；臨用前加入30mL蒸餾水充分溶解備用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。
試劑三：液體5 mL×1瓶，4℃保存；
試劑四：粉劑×1支，-20℃保存，臨用前加入4mL蒸餾水充分溶解備用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。
試劑五：粉劑×1支，-20℃保存；臨用前加入2mL蒸餾水充分溶解備用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。
試劑六：粉劑×1支，-20℃保存；臨用前加入250μL試劑一和250μL蒸餾水充分溶解備用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。
樣本的前處理：
1、細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
2、組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
3、血清（漿）樣品：直接檢測。
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