葡萄糖-6-磷酸6PG測(cè)試盒_糖酵解系列_分光法
測(cè)定方法：分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/24樣
注 意 ：正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義：
6PG (Glucose-6-phosphate，葡萄糖-6-磷酸，又稱6-磷酸葡萄糖)，是糖酵解和磷酸戊糖途徑的中間產(chǎn)物，廣泛存在于動(dòng)植物體和微生物中。在糖酵解的步反應(yīng)中，葡萄糖被己糖激酶催化生成葡萄糖-6-磷酸，然后通過(guò)磷酸葡萄糖異構(gòu)酶的催化形成果糖-6-磷酸，以繼續(xù)糖酵解的其它步驟；而在戊糖磷酸途徑中，葡萄糖-6-磷酸是其個(gè)底物，該過(guò)程也是生成NADPH的主要途徑。此外，葡萄糖-6-磷酸也能轉(zhuǎn)化形成糖原或淀粉而被儲(chǔ)存起來(lái)。
葡萄糖-6-磷酸6PG測(cè)試盒_糖酵解系列_分光法
測(cè)定原理：
6-磷酸葡萄糖脫氫酶可催化6PG和NADP+生成6磷酸葡萄糖酸和NADPH，NADPH在1-mPMS的作用下使WST-8顯橙，在450 nm下測(cè)定吸光值。
需自備的儀器和用品：
分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水。
試劑的組成和配制：
提取液：液體60 mL×1瓶，4℃保存；
試劑一：液體30mL×1瓶， 4℃保存；
試劑二：粉劑×1瓶，-20℃保存；
試劑三：液體3mL×1瓶， 4℃避光保存。
6PG提取：
1、細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液），超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）， 8000g，25℃離心10min，取上清待測(cè)。
2、組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿，8000g，25℃離心10min，取上清待測(cè)。
3、血清（漿）等液體樣品：直接測(cè)定。
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