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上海紀寧實業有限公司

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PRO含量測試盒(氧化與抗氧化系列)分光法

參  考  價:面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號50管/48樣

品牌

廠商性質經銷商

所在地上海市

更新時間:2022-07-27 11:17:52瀏覽次數:744次

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品牌 紀寧生物 貨期 現貨供應
有效期 6個月 用途 僅供科研實驗使用
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PRO含量測試盒(氧化與抗氧化系列)分光法

測定方法:分光光度法

產品規格:50管/48樣

注   意 :正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義:

Pro廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,逆境條件下,植物體內Pro含量顯著增加。Pro增加量在一定程度上反映了抗逆性,抗旱性強的品種往往積累較多的 pro。因此, pro增加量可以作為抗逆育種的生理指標之一。

PRO含量測試盒(氧化與抗氧化系列)分光法

測定原理:

用磺基水楊酸(SA)提取Pro,加熱處理后,Pro與酸性茚三酮溶液反應生成紅色;加甲苯萃取后,在520nm測定吸光度。

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需自備的儀器和用品:

可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿、冰乙酸50mL、甲苯50mL、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:冰乙酸25 mL×1瓶, 4℃保存。(自備)

試劑二:液體25 mL×1瓶, 4℃保存。

試劑三:甲苯50mL×1瓶,4℃保存。(自備)

樣品測定的準備:

1、細菌、細胞或組織樣品的制備:

細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);之后置95℃水浴振蕩提取10min;10000g,25℃離心10min,取上清,冷卻后待測。

組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行勻漿;之后置95℃水浴振蕩提取10min;10000g,25℃離心10min,取上清,冷卻后待測。

2、血清(漿)樣品:按照血清(漿)體積(mL):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議取0.1mL血清(漿)加入1mL提取液),充分混勻,之后置95℃水浴振蕩提取10分鐘,10000g,25℃離心10分鐘,取上清,冷卻后待測。

測定步驟:

1、分光光度計預熱30min以上,調節波長至520nm,蒸餾水調零。

2、樣本測定:

(1)取0.5mL樣本+0.5mL試劑一+0.5mL試劑二 于有蓋試管中,置95℃水浴中保溫30min(蓋緊,防止水分散失),每10min振蕩一次。

(2)待冷卻后,在試管中加入1mL試劑三,振蕩30s,靜置片刻,使色素轉至試劑三中;吸取0.8mL-1mL上

層溶液于1mL玻璃比色皿中,于520nm波長處比色,記錄吸光值A。


超氧化物歧化酶SOD測試盒(WST-8法)_分光法

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