脂質過氧化物(LPO)測試盒_分光光度法
測定方法:分光光度法
產品規格:50管/48樣
注 意:正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
脂質過氧化是動植物體內活性氧(ROS)氧化生物膜的過程,脂質過氧化物(LPO)是脂質過氧化過程的產物,即 ROS 與生物膜的磷脂、酶和膜受體相關的多不飽和脂肪酸的側鏈及核酸等大分子物質起脂質過氧化反應形成 LPO,使細胞膜的流動性和通透性發生改變,終導致細胞結構和功能的改變。因此,LPO 常被作為機體氧化應激的一種指標,與某些疾病的病理過程,如腫瘤、化學中毒、感染、炎 癥、自身免疫疾病、動脈粥樣硬化(AS)及心腦血管疾病,以及衰老等生理過程密切相關。
脂質過氧化物(LPO)測試盒_分光光度法
測定原理:
LPO 在酸性條件下加熱,產生小分子終產物 MDA,MDA 與硫代(thiobarbituric acid,TBA)縮合,生成紅色產物,在 535nm 有大吸收峰。
需自備的儀器和用品:
分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配置:
提取液:液體 60mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 48mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 18mL×1 瓶,4℃保存。
注意事項:
臨用前注意試劑二是否*溶解,如未溶解,可以 70℃-90℃加熱,并振蕩以促進溶解。
LPO 提取:
1、細菌、細胞或組織樣品的制備:
細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104 個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
2、血清(漿)樣品:直接檢測。