銅藍(lán)蛋白Cp含量測試盒(氧化與抗氧化系列)
測定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣
注 意:正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義:
銅藍(lán)蛋白是血漿的含銅蛋白,有運輸銅的功能,同時具有氧化酶的活性,是細(xì)胞外液重要的抗氧化劑。
銅藍(lán)蛋白Cp含量測試盒(氧化與抗氧化系列)
測定原理:
銅藍(lán)蛋白催化3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯胺生成藍(lán)色產(chǎn)物,在645nm處有特征吸收峰,依此可得銅藍(lán)蛋白活性。
自備實驗用品及儀器:
天平、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體15mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體10mL×1瓶,4℃保存。
試劑三:液體20mL×1瓶,4℃避光保存。(使用前37℃預(yù)熱)
測定操作表:
1、血清(漿)等液體樣本:直接檢測。
2、動植物組織樣本:稱取約0.1g組織,加入1mL蒸餾水,進(jìn)行冰浴勻漿。10000g ,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
計算公式:
1、按體積計算
單位定義:37℃條件下,每分鐘每毫升樣品與底物作用吸光值升高0.01為一個酶活單位。
Cp活力(U/mL)=×V反總÷V樣÷T=33.33×OD645
2、按鮮重計算
單位定義:37℃條件下,每分鐘每克樣品與底物作用吸光值升高0.01為一個酶活單位。
Cp活力(U/g鮮重)=×V反總÷(W×V樣÷V樣總)÷T=33.33×OD645÷W
3、按蛋白濃度計算
單位定義:37℃條件下,每分鐘每毫克蛋白樣品與底物作用吸光值升高0.01為一個酶活單位。
Cp活力(U/mg prot)=×V反總÷(Cpr×V樣)÷T=33.33×OD645÷Cpr
V樣:0.1 mL;V反總:1 mL;T:反應(yīng)時間,30min;V樣總:加入提取液體積,1mL; Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g