淀粉系列_β-淀-粉酶(β-AL)測(cè)試盒
測(cè)定方法:微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣
注 意:正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
淀-粉酶負(fù)責(zé)水解淀粉,主要包括α-淀-粉酶和β-淀-粉酶。β-淀-粉酶(EC 3.2.1.2)可隨機(jī)地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷鍵,生成葡萄糖、麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原糖。
淀粉系列_β-淀-粉酶(β-AL)測(cè)試盒
測(cè)定原理:
還原糖還原3,5-二硝基水楊酸生成棕紅色物質(zhì)。α-淀-粉酶不耐酸,β-淀-粉酶不耐熱。根據(jù)上述特性,鈍化其中之一,就可測(cè)出另一種淀-粉酶的活力。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、恒溫水浴鍋、離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
試劑一:30mL×1瓶,常溫保存,若有晶體析出,需90℃加熱溶解后再用;
試劑二:15mL×1瓶,4℃保存,若出現(xiàn)沉淀析出,需70℃加熱溶解后再用。
粗酶液提取:
組織:稱取0.1~0.2g樣本(建議稱取約0.1g樣本),加入1mL蒸餾水,研磨勻漿;將勻漿倒入離心管中,提取液在室溫下放置提取15min,每5min振蕩1次,使其充分提取;3000g,25℃離心10min,取上清液加蒸餾水定容至10 mL,搖勻,即淀-粉酶原液。
吸取上述淀-粉酶原液1mL,加入4mL蒸餾水,搖勻,即為淀-粉酶稀釋液,用于(α+β)淀-粉酶總活力的測(cè)定。
血清(漿)等液體樣本:(1)直接檢測(cè)α-淀-粉酶。(2)吸取淀-粉酶原液1mL,加入4mL蒸餾水,搖勻,即為淀-粉酶稀釋液,用于(α+β)淀-粉酶總活力的測(cè)定。