脲酶(UE)測(cè)試盒_氮代謝系列
測(cè)定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/24樣
注 意: 正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
UE能夠水解尿素,產(chǎn)生氨和碳酸。UE活性與有機(jī)物質(zhì)含量、全氮和速效氮含量呈正相關(guān),反應(yīng)了氮素狀況。
脲酶(UE)測(cè)試盒_氮代謝系列
測(cè)定原理:
利用靛酚藍(lán)比色法測(cè)定脲酶水解尿素產(chǎn)生的NH3-N。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1ml比色皿、研缽、冰、和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:粉劑×1瓶,臨用前加入5mL蒸餾水,充分溶解待用,4℃保存;用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體12mL×1瓶,4℃保存;
試劑三A液:液體×1支,4℃保存;試劑三B液:液體×1瓶,4℃保存;臨用前將A液倒入B液中混合,待用;用不完的試劑4℃保存一周;
試劑四:液體5mL×1瓶,4℃保存;
樣本的前處理:
1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備:
細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
2、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。