Fd谷-氨酸合成酶Fd-GOGAT測試盒_氮代謝系列
測定方法:分光光度法
產品規格:50管/24樣
注 意:正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
Fd谷-氨酸合成酶Fd-GOGAT測試盒_氮代謝系列
測定意義:
GOGAT 廣泛分布于植物中,和谷-氨酰胺合成酶共同構成 GS/GOGAT 循環,參與氨同化的調控。GOGAT 分為以 NADH 為還原劑的 NADH-GOGAT 和以鐵氧還蛋白為還原劑的Fd-GOGAT。Fd-GOGAT 主要存在于葉綠體基質中,與光合作用和光呼吸有關,主要同化NO3-還原和光呼吸產生的 NH4+。
測定原理:
Fd-GOGAT 催化谷-氨酰胺的氨基轉移到 α-酮戊二酸,形成兩分子的谷-氨酸,谷-氨酸脫氫酶催化谷-氨酸的脫氫反應,同時產生 NADH,使 WST-8 顯橙,在 450 nm 下測定吸光值。
需自備的儀器和用品:
分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體 60mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用前加入 6mL 試劑六溶解待用,用不完的試劑 4℃保存;試劑二:液體 3mL×1 瓶,4℃避光保存;
試劑三:粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用前加入 5mL 蒸餾水溶解待用,用不完的試劑 4℃保存;試劑四:粉劑×1 瓶,-20℃保存;臨用前加入 50mL 試劑六溶解待用,用不完的試劑分裝后-20℃保存;
試劑五:液體 6mL×1 瓶,4℃避光保存;
試劑六:液體 60mL×1 瓶,4℃保存;
粗酶液提?。?br/>
按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液),進行冰浴勻漿。10000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。