天冬酰胺合成酶(AS)試劑盒_氮代謝系列
測定方法:分光光度法
產品規格:50管/48樣
注 意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
天冬酰胺合成酶是廣泛存在于生物體內的一類氨基轉移酶,催化谷氨酞胺的氨基向天冬氨酸轉移。當植物處于氨毒時天冬酞胺的形成是一種解毒反應。
天冬酰胺合成酶(AS)試劑盒_氮代謝系列
測定原理:
AS催化L-天冬酰胺水解成L-天冬氨酸和氨,利用奈氏試劑檢測氨增加的速率,即可計算其酶活性。
需自備儀器和用品:
臺式離心機、可見分光光度計、水浴鍋、1mL玻璃比色皿、可調式移液槍、研缽、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一×1瓶,60 mL,4 ℃保存;
試劑二×1瓶,20 mL,4 ℃保存;
試劑三×1瓶,30 mL,常溫保存;
試劑四×1瓶,10 mL,常溫保存;
試劑五×1瓶,6 mL,常溫保存;
試劑六×1瓶,6 mL,常溫避光保存。
粗酶液提取:
1、細菌、細胞或組織樣品的制備:
細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2、血清(漿)樣品:直接檢測。