果膠甲酯化程度測試盒_果膠系列
測定方法:分光光度法
產品規(guī)格:50管/48樣
注 意:正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
植物細胞壁中的果膠是植物初生細胞壁的主要成分,除了起結構支撐、物質運輸等作用外,還具有抵抗逆境的作用。果膠甲酯化程度影響了細胞壁的堅韌程度及其抗性。
果膠甲酯化程度測試盒_果膠系列
測定原理:
果膠甲酯鍵經皂化處理后釋放出甲醇,甲醇與 2,4-戊二酮反應顯色,在 412nm 下測定吸光值;同時半乳糖醛酸在 70℃下與濃硫酸反應生成 5-甲酰基-2-呋喃甲酸,5-甲酰基-2-呋喃甲酸與 3,5-二甲-基苯-酚反應產生有色物質,在 450nm 下有大吸光值。以甲醇生成量與半乳糖醛酸含量的比值代表果膠甲酯化程度。
自備實驗用品及儀器:
天平、低溫離心機、分光光度計、1mL 玻璃比色皿、恒溫水浴鍋、蒸餾水、硫酸。
試劑組成和配制:
提取液:液體 60mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 6mL×1 瓶,4℃保存。
試劑二:液體 6mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑四:液體 4mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑五:粉劑×1 瓶,4℃避光保存;臨用前加入 32mL 試劑六充分溶解待用,用不完的試劑 4℃避光保存。
試劑六:液體 35mL×1 瓶,4℃保存。
試劑七:液體 4mL×1 瓶,4℃保存。
試劑八:液體 3mL×1 瓶,4℃避光保存。
酶液提取:
稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 蒸餾水,進行冰浴勻漿。10000g 4℃離心 10min,棄上清,留沉淀。沉淀中加入 1mL 提取液,混勻后 90℃水浴 2h,冷卻至室溫,10000g4℃離心 10min,取上清待測。