土壤系列_土壤酸性轉(zhuǎn)化酶(S-AI)測試盒
測定方法:微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣
注 意 :正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
S-AI在pH 為4.5~5.0(酸性)條件下催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,是土壤微生物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一。
測定原理:
S-AI催化蔗糖降解產(chǎn)生還原糖,進一步與3,5-二硝基水楊酸反應(yīng),生成棕紅色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范圍內(nèi)510nm光吸收增加速率與AI活性成正比。
自備用品:
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體50mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入25mL試劑一充分溶解備用;用不完的試劑4℃保存;
試劑三:液體10mL×1瓶,4℃保存;
土壤系列_土壤酸性轉(zhuǎn)化酶(S-AI)測試盒
樣品處理:
新鮮土樣自然風干或37度烘箱風干,過30~50目篩。
測定步驟和加樣表:
試劑名稱(μL)測定管對照管
風干土樣(g)0.050.05
試劑一400
試劑二400
混勻, 37℃準確水浴30min后,95℃水浴10min(蓋緊,以防水分散失),流水冷卻后
充分混勻(以保證濃度不變),10000g 25℃離心10min,取上清液
上清液200200
試劑三 100100
混勻,95℃水浴10min(蓋緊,以防止水分散失),流水冷卻后充分混勻, 510nm處,記錄各管吸光值A(chǔ),如果吸光值大于2,可以用蒸餾水稀釋后測定(計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)),ΔA=A測定-A對照。