鳥-氨酸轉(zhuǎn)氨酶(OAT)測(cè)試盒_氨基酸代謝系列
測(cè)定方法：分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣
注 意： 正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義
脯-氨酸是植物體內(nèi)適應(yīng)逆境脅迫的一種重要的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)。高等植物中脯-氨酸代謝因其初始底物不同，分為谷-氨酸( Glu) 和鳥-氨酸( Orn) 兩條合成途徑。鳥-氨酸轉(zhuǎn)氨酶( δ-OAT) 是 是以鳥-氨酸為前體合成脯-氨酸途徑的關(guān)鍵酶，對(duì)植物適應(yīng)逆境脅迫起關(guān)鍵作用。
鳥-氨酸轉(zhuǎn)氨酶(OAT)測(cè)試盒_氨基酸代謝系列
測(cè)定原理
鳥-氨酸和α-酮戊二酸在鳥-氨酸轉(zhuǎn)氨酶和NADH作用下發(fā)生氨基轉(zhuǎn)移反應(yīng)生成吡咯啉-5-羧酸（P5C），同時(shí)產(chǎn)生NAD，通過(guò)檢測(cè)340nm處的吸光度的變化可反映出鳥-氨酸轉(zhuǎn)氨酶活性的高低。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、低溫離心機(jī)、研缽、紫外可見分光光度計(jì)、1mL石英比色皿。
試劑組成和配制
提取液：液體55mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體70 mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存；臨用前加20mL試劑一充分溶解；用不完的試劑4℃保存。
試劑三：粉劑×1瓶，4℃保存；臨用前加20mL試劑一充分溶解；用不完的試劑4℃保存。
試劑四：粉劑×2瓶，-20℃保存；臨用前每瓶加10mL試劑一充分溶解；現(xiàn)配現(xiàn)用。
酶液提取
1.組織：按照質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，冰浴勻漿后于4℃，10000g離心10min，取上清置冰上待測(cè)。
2.細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；然后4℃，10000g離心10min，取上清置冰上待測(cè)。
液體：直接檢測(cè)。
環(huán)保在線