糖代謝系列_ 糖原含量測試盒
測定方法:微量法
產品規格:100管/96樣
注 意 :正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
糖原是由葡萄糖單位構成的高分子多糖,是糖的主要的儲存形式之一,主要貯存在肝和肌肉中作為備用能量,分別稱為肝糖原和肌糖原。肝糖原可調節血糖濃度,當血糖升高時可在肝臟合成糖原,血糖降低時,肝糖原則分解為葡萄糖以補充血糖。因此,肝糖原對維持血糖的相對平衡十分重要。肌糖原是肌肉中糖的儲存形式,在劇烈運動消耗大量血糖時,肌糖原不能直接分解成血糖,必須先分解產生乳酸,隨血液循環到肝臟,通過糖異生轉變為肝糖原或葡萄糖。
糖代謝系列_ 糖原含量測試盒
測定原理:
蒽酮法。利用強堿性提取液提取糖原,在強酸性條件下利用蒽酮顯色劑測定糖原含量。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、濃硫酸(不允許快遞)和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:0.1mg/mL 的葡萄糖標準液 10mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1瓶, 4℃保存;
糖原提取:
1﹑細胞或細菌:收集500~1000萬細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;加入0.75mL提取液超聲波破碎細菌或細胞(功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);轉移至10mL試管中,95℃水浴20min(蓋緊,防止水分散失),隔5min振搖試管1次,使充分混勻;取出試管冷卻后,用蒸餾水定容到5ml,混勻,8000g 25℃離心10min,取上清液待測。
2﹑組織:稱取0.1~0.2g樣品,加入0.75ml提取液充分勻漿;轉移至10ml試管中;95℃水浴20min(蓋緊,防止水分散失),隔5min振搖試管1次,使充分混勻;待組織全部溶解后,取出試管冷卻后,用蒸餾水定容到5ml,混勻,8000g 25℃離心10min,取上清液待測。
測定步驟:
1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調節波長至620nm,蒸餾水調零。
2、調節水浴鍋至95℃。
3、試劑二工作液的配制:在試劑二中倒入6mL蒸餾水,緩慢倒入24mL濃硫酸,充分溶解混勻后使用;用不完的試劑4℃保存一周