糖代謝系列_N乙酰βD葡萄糖苷酶NAG測試盒
測定方法:微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣
注 意 :正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
NAG是溶酶體中的一種酸性水解酶,廣泛存在于各種組織、體液和細胞中,以前列腺和腎近曲小管細胞內(nèi)含量。NAG活性變化與機體某些病理狀態(tài)密切相關。
測定原理:
NAG分解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成對-硝基苯-酚,后者在400nm有大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算NAG活性。
糖代謝系列_N乙酰βD葡萄糖苷酶NAG測試盒
自備用品:
酶標儀/可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水,充分溶解備用;用不完的試劑仍-20℃保存。
試劑二:液體4mL×1瓶,4℃保存。
試劑三:液體13mL×1瓶,4℃保存。
粗酶液提取:
1、細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);15000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。15000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
3、血清(漿)樣品:直接檢測。