酸性磷酸酶(ACP)測試盒_酯酶系列_分光法
測定方法:分光光度法
產品規格:50管/24樣
注 意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
ACP在酸性條件下催化磷酸單酯水解稱無機磷酸,常見于巨噬細胞的溶酶體內。ACP常用于前列腺癌的輔助診斷。
酸性磷酸酶(ACP)測試盒_酯酶系列_分光法
測定原理:
在酸性環境中,ACP催化對硝基苯磷酸二鈉水解生成4-硝基,在405nm有特征光吸收;通過測定405nm吸光度增加速率,來計算ACP活性。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、分析天平、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、冰、可調式移液器和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體60mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體25mL×1瓶,4℃保存。
試劑三:液體25mL×1瓶,4℃保存。
粗酶液提取:
1.組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿,4℃、10000g離心10min,取上清液待測。
2.細菌或細胞:按照細菌或細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后10000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。
血液可直接測定,或者適當稀釋后測定。