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氧化型GSSG含量測試盒谷胱系列_分光光度法

參  考  價:面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號50管/48樣

品牌

廠商性質經銷商

所在地上海市

更新時間:2022-07-26 10:20:16瀏覽次數:519次

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品牌 紀寧生物 貨期 現貨供應
有效期 6個月 用途? 科研實驗使用
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氧化型GSSG含量測試盒谷胱系列_分光光度法

測定方法:分光光度法

產品規格:50管/48樣

注    意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義:

GSH/GSSG是細胞內重要的氧化還原對之一。因此,測定細胞內GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值,能夠很好地反映細胞所處的氧化還原狀態,也是(GSSG)氧化還原循環的主要指標之一。

測定原理:

利用2-VP法測GSSG含量。


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自備儀器和用品:

可見分光光度計、低溫離心機、水浴鍋、可調節移液器、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。

試劑組成和配置:

試劑一:液體50mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體300μL×1支,4℃保存。

試劑三:液體50mL×1瓶,4℃保存。

試劑四:液體6mL×1瓶,4℃保存。

試劑五: 液體30μL×1瓶,-20℃保存。臨用前加入0.6 mL試劑三稀釋,4℃保存。

試劑六:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加入40 mL試劑三溶解,現配現用。

氧化型GSSG含量測試盒谷胱系列_分光光度法

粗酶液提取:

1. 組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清液(如上清不清澈,再離心3min)待測。

2. 細菌、真菌:按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);8000g 4℃離心10min,取上清液(如上清不清澈,再離心3min)的蒸餾水混勻待測。

3. 血清等液體:直接測定。

測定操作:

1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到412 nm,蒸餾水調零。

2. 試劑三置于25℃(一般物種)或者37℃(哺乳動物)水浴中保溫30min。

3. 測定管:取1 mL EP管,加入100 μ L上清液,5μ L試劑二,蓋緊后混勻,置于37℃水浴30min;依次加入100 μ L試劑四,10 μ L試劑五,700 μ L試劑六,迅速混勻后,立即測定30 s和150 s光吸收A1和A2,計算ΔA=A2-A1。


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