(輔酶Ⅰ)NAD蘋果酸脫氫酶(NAD-MDH)測試盒
測定方法：微量法
產品規(guī)格：100管/96樣
注 意：正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義：
MDH （EC 1.1.1.37）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，線粒體中 MDH 是 TCA 循環(huán)的關鍵酶之一，催化蘋果酸形成草酰乙酸；相反，胞漿中 MDH 催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產物， 連接多條重要的代謝途徑。因此，MDH 在細胞多種生理活動中扮演著重要的角色，包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據不同的輔酶特異性，MDH 分為 NAD-依賴的 MDH 和 NADP-依賴的MDH，細菌中通常只含有 NAD-MDH，在真核細胞中，NAD-MDH 分布于細胞質和線粒體中。
測定原理：
NAD-MDH 催化 NADH 還原草酰乙酸生成蘋果酸，導致 340nm 處光吸收下降。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96 孔板和蒸餾水。
(輔酶Ⅰ)NAD蘋果酸脫氫酶(NAD-MDH)測試盒
試劑的組成和配制：
試劑一、提取液 100 mL×1 瓶，在 4℃保存；
試劑二、液體 20 mL×1 瓶，在 4℃保存；
試劑三、粉劑×1 瓶，-20℃保存；
樣本測定的準備：
1、細菌、細胞或組織樣品的制備：
細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數(shù)量（104 個）：試劑一體積（mL）為 1000~2000：1 的比例（建議 2000 萬細菌或細胞加入 1mL 試劑一），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）；8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。
組織：按照組織質量（g）：試劑一體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 試劑一），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。
2、血清（漿）樣品：直接檢測。
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