1.類風濕因子（rheumatoid factors,RF）在類風濕病人、別的疾病以及正常人血清中,常富含較高或不一樣濃度的RF，RF通常為TgM型，亦有IgG和IgA型，RF具有與變性IgG發作非特異的特色，由于在ELISA測定中，其可與固相上包被的特異抗體IgG以及隨后參加的酶標的特異抗體IgG，然后呈現假陽性成果。尤其是在捕獲法IgM型特異抗體的測定中體現zui為顯著，由于此時固相包被的抗體為抗人弘鏈抗體，IgM型RF的存在可使其很多于固相。為避免RF對ELISA測定的攪擾，通常可以采納下述辦法：
（1）稀釋標本：這在判別急性病原體傳染的特異IgM抗體如抗HAVIgM，抗HBclgM， TORCH的IgM抗體查驗等尤為有用。由于急性傳染時，血循環中特異的IgM抗體滴度通常很高，而RF滴度通常相對要低得多。因而，在測定前對標本進行稀釋，特異的IgM因高滴度存在仍可檢出，而非特異的RF則會由于稀釋變成十分低的滴度，然后對測定幾乎不發作攪擾。如今，有些特異IgM檢查ELISA試劑盒不請求稀釋標本，直接檢查，這么雖然方便了實驗室技術人員的操作，但簡單呈現假陽性成果，而且由于某些慢性傳染，如HBV的傳染，血循環中抗HBelgM可繼續以必定的滴度存在，標本不做稀釋即進行檢查，即可呈現陽性成果，然后失掉抗HBclgM用于HBV急性傳染的確診價值。因而，在臨床實驗室，必定要運用請求對標本做1:1000稀釋的試劑盒進行查驗，然后確保相應檢查項目成果的可靠性及臨床運用價值。
（2）改變酶標抗體：由于RF的是IgG的Fc片段，假如將待酶標的抗體的F，片段酶切夫除，僅留下具有特異功用的F（ab’）2部分符號酶，則在測定中即可避免RF的攪擾。
（3）標本中RF用變性IgG預先關閉：將經熱變性（63℃，10min）的動物如兔、羊等的IgG參加到標本稀釋液中，或是將該變性IgG銜接至一顆粒固相如聚苯乙烯微球或微孔，然后參加臨床血清標本，反響后，再吸出標本進行檢查。此外，在測定特異IgM時，也可運用抗人IgG去掉臨床標本中RF和IgG。
（4）測定抗原時，可在標本中參加可使RF降解的還原劑：如2—巰基乙醇。2—巰基乙醇等還原劑可使抗體內的巰基裂解，因而可以去掉RF的攪擾，但只適用于抗原測定。
（5）包被或酶標二抗運用特異的雞抗體IgY：RF不與雞IgY反響，假如包被和酶標二抗均為雞IgY抗體，則不受標本中RF的攪擾。
2.補體在固相酶免疫測定中，來自哺乳動物的固相特異抗體和酶標二抗均有激活人補體體系的功用。一方面，固相抗體和酶標二抗可由于其在固相吸附及過程中，抗體分子發作變構，然后其F, 段的補體C1，位點被露出出來，這么C1，就變成一個中介物將二者交聯起來，然后呈現假陽性成果。另一方面，固相抗體也會由于活化補體的，關閉抗體的抗原表位才能，而致使假陽性成果或使定量測定成果偏低。由補體致使的攪擾可通過下述辦法避免：
（1）對臨床血清標本加熱滅活補體：選用56~C30min加熱可使標本中的補體C1。滅活。
（2）包被或酶標二抗運用特異的雞抗體：雞抗體不激活人的補體體系，因而，運用特異的雞抗體，不會呈現因補體激活而存在的假陽性和假陰性攪擾。
3.異嗜性抗體（heterophilieantibodies）人類血清中富含抗嚙齒類動物（如鼠、馬、羊等）的免疫球蛋白（lg）的抗體，即天然的異嗜性抗體。有研討表明，天然的異嗜性抗體（lgG）可分為兩類，一類（85%的假陽性由其致使）可于山羊、小鼠、大鼠、馬和牛IgG的Fab區域，但不與兔IgG的Fab區。另一類（15%的假陽性由其致使）可于小鼠、馬、牛和兔IgG的Fc區表位，但不與山羊和大鼠IgG的Pc區表位。異嗜性抗體可通過交聯固相和酶標的單抗或多抗而呈現假陽性反響。由異嗜性抗體致使的攪擾可通過下述辦法避免：
（1）運用特異的兔F（ab’）2。片段作為固相或測定酶標抗體。
（2）在標本或標本稀釋液中參加過量的動物Ig，關閉也許存在的異嗜性抗體。但參加量缺乏或亞類不一樣時無效。
（3）運用靶特異的非Ig親和蛋白（affibody）代替固相或酶標抗體之一。選用噬菌展現來自單個金葡萄球A蛋白（SPA）聯合文庫的人IgA親和蛋白，用于IgA的測定，不受異嗜性抗體的影響。
4.因運用鼠抗體醫治或確診誘導的抗鼠Ig抗體在臨床上，有嘗試運用鼠源性單克隆抗體進行靶向醫治，及運用放射性核索符號鼠源性單克隆抗體進行印象確診等，均有也許使相應病人體內發作抗鼠抗體。這種抗鼠抗體對運用鼠源性單克隆抗體的酶免疫測定，可發作假陽性成果。由抗鼠抗體致使的攪擾可通過下述辦法避免：
（1）運用的特異的抗體（F，。bf）:片段作為固相或測定酶標抗體。
（2）在標本或標本稀釋液中參加過量的鼠Ig，關閉也許存在的抗鼠抗體。
（3）運用特異的雞抗體IgG作為固相和測定抗體。雞IgG不與人抗鼠抗體反響。因而，用其作為固相或酶標抗體不會呈現假陽性成果。
5.本身抗體 本身抗體如抗甲狀腺球蛋白、抗胰島索等，能與其相應靶抗原成果構成復合物，在ELISA辦法中可攪擾相應原抗體的測定。為避免以上狀況呈現，可在測定前用理化辦法將其解離。
6. 溶菌酶溶菌酶可與等電點較低的蛋白有強的才能。免疫球蛋白等電點約為5，因而，在雙抗體夾心法ELISA測定中，溶菌酶可在包被的IgG和酶標的IgG間構成橋接，然后致使假陽性。因而，為確保ELISA測定的可靠性，有必要從標本中去掉溶菌酶或將其關閉，Cu2+離子和卵白蛋白可有效地關閉溶菌酶，避免其銜接IgG。
內源性攪擾要素通常包含類風濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些本身抗體、因運用鼠抗體醫治或確診誘導的抗鼠Ig抗體、穿插反響物質等。在平時的臨床血清（漿）標本中，有相當份額不一樣程度的富含上述各種攪擾物質，然后致使測定成果的假陽性。