導讀:我們在做實驗時,常會遇到elisa試劑盒顯色淡靈敏度偏低的問題,以下是根據不同問題可能原因及其防止方法總結,僅供參考。
可能原因及防止方法:
1.孵育反應時間不足定時鐘準確定時 。
2.洗滌時沖擊力太大,洗滌液浸泡時間太長,洗滌次數增加
減少洗滌沖擊力,按說明書要求保留洗滌時間,準確記住洗滌次數。
3.顯色劑滴加量不足或順序顛倒,或混合后加入滴加顯色液時,滴瓶垂直向下,持力均勻,滴速不宜過快,先加顯色劑 A,反加顯色劑B,不可將A、B液混合后加入。
4.顯色劑反應時間不足準確定時。
5.蒸餾水水質有問題
測定蒸餾水配制試劑對酶免疫法的影響。
6.elisa試劑盒在運輸途中時間太長,溫度太高
試劑盒置保溫箱內運輸,并放足夠數量的冰塊,盡量縮短運輸時間。
7.試劑、樣品用前未能平衡
用前試劑、樣品置室溫平衡 30分鐘左右。
8.樣品和NaN 3 防腐,抑制了酶的反應
樣品不能加 NaN 3 防腐。
9.試劑盒超過有效期
超過效期試劑盒不要使用。
10.試劑開啟時間過長長菌
試劑開啟后請盡量在短時間內用完。
11.移液器吸量不足,移液抽吸排放太快,吸頭內壁掛液太多或內壁不清潔
校正移液器,吸頭要配套,每次裝吸頭要吻合緊密。移液不宜過快,排放應*。吸頭內壁要清潔,一次性使用。
12.elisa試劑盒恒溫箱溫度不足37℃或水浴鍋水溫度不足37℃)
放入反應板時注意培養箱溫度,及時調整,孵育反應期間開啟不宜太多,影響溫度平衡。