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做試驗(yàn)的時分你知道ELISA捕獲包被法檢測抗體原理和進(jìn)程嗎,上海紀(jì)寧實(shí)業(yè)有限公司來奉告你。
一、原理
捕獲包被法(亦稱反向間接法)ELISA,首要用于血清中某種抗體亞型成分(如IgM)的測定。以現(xiàn)在常用的IgM測定為例,因血清中針對某種抗原的特異性IgM和IgG一起存在,則后者可煩擾IgM的測定。因此先將全部血清IgM(包含異性IgM和非特異性IgM)固定在固相上,在去除IgG后再測定特異性IgM。IgM抗體的檢測用于盛行癥的前期確診中。先用抗人IgM抗體包被固相,以捕獲血清標(biāo)本中的IgM(其中包含針對抗原的特異性IgM抗體和非特異性的IgM)。然后參與抗原,此抗原僅與特異性IgM相結(jié)合。繼而加酶符號針對抗原的特異性抗體。再與底物作用,呈色即與標(biāo)本中的IgM成正相關(guān)。此法常用于病毒性感染的前期確診。類風(fēng)濕因子(RF)相同能煩擾捕獲包被法測定IgM抗體,導(dǎo)致假陽性反響。因此中和IgG的間接法近來頗受喜愛,用這類試劑檢測抗CMV IgGM和抗弓形蟲IgM抗體已獲成功。
捕獲法測抗體的簡明操作進(jìn)程:
1.特異性捕獲抗體的包被,先把能特異性結(jié)合待測抗原的抗體固定于固相載體外表;
2.參與待測樣品,經(jīng)過固定在載體外表的針對該抗原的抗體固定于載體外表;
3.參與特異性抗原以及針對該特異性抗原的酶標(biāo)抗體;
4.參與酶促反響底物,發(fā)生顯色反響,顯色的深淺與待測抗體的量成正比。
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