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今天提供一套小分文章的實(shí)驗(yàn)套路,基于純細(xì)胞和分子生物學(xué)的藥理學(xué)研究。
1、首先使用時(shí)間或是濃度梯度的藥物處理細(xì)胞,這里的細(xì)胞有兩種,一種是細(xì)胞系一種是原代細(xì)胞,這樣減少永生化細(xì)胞對(duì)結(jié)果的影響。然后觀察不同濃度和時(shí)間處理?xiàng)l件下的細(xì)胞活性,這里的活性檢測(cè)可以使用臺(tái)盼藍(lán)拒染實(shí)驗(yàn)和LDH毒性試驗(yàn)。
2、隨后,要使用CCK8排除細(xì)胞增殖對(duì)結(jié)果的影響,因?yàn)殡S著藥物處理時(shí)間的延長(zhǎng),細(xì)胞數(shù)量必然會(huì)干擾試驗(yàn)結(jié)果,因此需要通過判斷細(xì)胞的生長(zhǎng)周期,來(lái)確認(rèn)處理濃度和處理時(shí)間。
3、確認(rèn)時(shí)間和濃度后,觀察細(xì)胞的功能學(xué)改變,這里就需要涉及到研究的目的了!
例如腫瘤遷移、干細(xì)胞分化、細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡等,不同的功能實(shí)驗(yàn)取決于你的實(shí)驗(yàn)本身目的。在這一步中,通常要設(shè)計(jì)定量和定性研究,例如細(xì)胞增殖,需要判斷細(xì)胞增殖的比例、以及細(xì)胞增殖周期中的蛋白表達(dá)變化。
4、后面的一步是機(jī)制研究,機(jī)制研究主要有三點(diǎn):通路研究、蛋白相互作用研究和基因轉(zhuǎn)錄前后的研究。可以選擇其中一點(diǎn)來(lái)做,也可以三者都做。
通過機(jī)制研究,來(lái)解釋藥物作用對(duì)細(xì)胞功能學(xué)改變的途徑。
由此形成典型的三步:
1 藥物模型的建立、
2 功能改變的探究、
3 機(jī)制的發(fā)現(xiàn)。
上述研究方法,上海紀(jì)寧有著雄厚技術(shù)的支持,可以幫您完成經(jīng)典的純細(xì)胞分子生物研究,我們有豐富的細(xì)胞庫(kù)、扎實(shí)的大生物研究經(jīng)驗(yàn)、以及個(gè)性化實(shí)驗(yàn)方案修正,幫助您攻克實(shí)驗(yàn)過程中的各種技術(shù)難關(guān)。更多科研消息,歡迎詳詢上海紀(jì)寧。
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