收到細(xì)胞后的處理方法

     不管是有經(jīng)驗(yàn)或是剛剛從事細(xì)胞培養(yǎng)工作的人員都應(yīng)該認(rèn)真仔細(xì)地詢(xún)問(wèn)下細(xì)胞提供方提供的建議，提前了解所要培養(yǎng)細(xì)胞的詳細(xì)資料，準(zhǔn)備好細(xì)胞所要用到的培養(yǎng)基和相關(guān)試劑。zui近好多客戶(hù)打來(lái)，問(wèn)到有關(guān)細(xì)胞在收到后應(yīng)該怎么處理的正確方法，今天我們豐壽生物科技就針對(duì)這個(gè)問(wèn)題提出以下一些建議：

1.收到細(xì)胞，時(shí)間要鏡檢：觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常，對(duì)于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細(xì)胞密度，有疑議及時(shí)咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員。由于運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間或者溫度的變化，很多貼壁細(xì)胞在盛滿(mǎn)培養(yǎng)基的瓶子里生長(zhǎng)的狀態(tài)和平時(shí)會(huì)有點(diǎn)不一樣，主要是貼壁牢固問(wèn)題。比如293T，平時(shí)貼壁就不是很牢，在裝滿(mǎn)的培養(yǎng)基瓶子里面，會(huì)發(fā)生大片的脫落，細(xì)胞聚集在一起，但是細(xì)胞生長(zhǎng)還是正常的，通過(guò)離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長(zhǎng)。

2.當(dāng)通過(guò)上一步的觀察，細(xì)胞初步?jīng)]有任何問(wèn)題時(shí)，進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時(shí)，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。細(xì)胞在低于正常生長(zhǎng)溫度情況下，會(huì)調(diào)整為靜止期，或者慢速生經(jīng)久，必須恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個(gè)小時(shí)左右，才能重新調(diào)整到接近對(duì)數(shù)生經(jīng)久的狀態(tài)，在對(duì)數(shù)生經(jīng)久進(jìn)行細(xì)胞的傳代會(huì)大大增加傳代的成功率，和細(xì)胞的存活率。

3.如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過(guò)90%，并且細(xì)胞狀態(tài)很好時(shí)，則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。對(duì)于生長(zhǎng)比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細(xì)胞可以一次多傳幾瓶；對(duì)于生長(zhǎng)較慢，細(xì)胞比較薄，狀態(tài)容易波動(dòng)的細(xì)胞類(lèi)型，一次少傳些，保證每瓶細(xì)胞密度大些，便于穩(wěn)定生長(zhǎng)。至于一些比較陌生的細(xì)胞，次處理也可以依照第二種情況。

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