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酶聯(lián)免疫吸附實驗中血清 的詳細處理保存意見

時間:2019-4-19閱讀:1051
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ELISA試劑盒行將已知的抗原或抗體吸附在固相載體外表,使酶符號的抗原抗體反響在固相外表進行的技能。該技能
可用于檢測大分子抗原和特異性抗體等,具有快速、活絡、簡潔、載體易于標準化等優(yōu)點。酶聯(lián)免疫吸附實驗中血清
的詳細處理保存意見:
(1)要留意防止呈現(xiàn)嚴峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有相似過氧化物的活性,因而,在以HRP為符號酶的
ELISA測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡單在溫育過程中吸附于固相,然后與后邊參加的HRP
底物反響顯色。
(2)ELISA試劑盒標本在保存中如呈現(xiàn)細菌污染所形成的的混濁或絮狀物時,應離心沉淀后取上清檢測。
(3)ELISA試劑盒樣本的收集及血清別離中要留意盡量防止細菌污染,一則細菌的成長,其所分泌的一些酶可能會對
抗原抗體等蛋白發(fā)生分化效果;二則一些細菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶自身會對用相應酶作符號的測定
辦法發(fā)生非特異性干擾。
(4)血清標本如是以無菌操作別離,則能夠在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時間保
存,應在-70℃以下。
(5)冰凍保存的血清標本須留意防止因停電等形成的重復凍融。標本的重復凍融所發(fā)生的機械剪切力將對標本中的蛋
白等分子發(fā)生損壞效果,然后引起假陰性成果。此外,凍融標本的混勻亦應留意,不要進行劇烈振動,重復倒置混
勻即可。

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