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elisa kit使用時應了解小常識:
A、檢測要適量:切勿使用過多的檢測試劑,如濃度過高,或者未正確稀釋,則會導致高背景,也不要顯色過度,如有必要,優化一下何時應加入終止液。
B、洗滌很重要:洗滌步驟看似很無聊,其實很重要,因為如果未結合的材料殘留在微孔板中,那么它會增加背景噪音,可增加洗滌液中的鹽濃度,這會阻止非特異結合反應,背景過高,可以嘗試增加洗滌次數。
C、封閉更關鍵:封閉液的作用是讓不相關的蛋白占據微孔板中潛在的結合位點,可降低產生信號的抗體非特異結合機會,如背景過高,懷疑封閉不充分,可嘗試使用更高濃度的封閉液,或適當延長封閉時間。
elisa kit顯色淡及靈敏度偏低的解決辦法:
(1)試劑盒從2~8℃冰箱取出后打開盒蓋,于室溫平衡至少20分鐘,確保所有試劑已平衡至室溫。
(2)注意培養箱溫度,放入反應板后盡量減少開啟次數以免影響溫度恒定,非隔水式培養箱尤其應注意。
(3)盡量縮短運輸時間,夏季應放冰塊降溫。
(4)校正定時鐘準確定時。
(5)按說明書要求保留洗滌時間,準確記住洗滌次數。
(6)校正移液器,吸嘴要配套,裝吸嘴時要緊密,吸嘴內壁要清潔,一次性使用。
(7)使用新鮮合格的蒸餾水。
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