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血清中含有蛋白質、氨基酸、葡萄糖、激素等,其間蛋白質主要為白蛋白和球蛋白。氨基酸有多種,是細胞合成蛋白質的基本成分,其間有些氨基酸動物細胞自身不能合成,必定要由培養液提供。
血清激素有胰島素、成長激素等及多種成長因子(如表皮成長因子、成纖維細胞成長因子、類胰島素成長因子等)血清還含有多種不知道的促細胞成長因子、促貼附因子及其他活性物質,能促進細胞的成長、增殖和貼附。
因而,細胞培養時,要確保細胞能夠順暢成長和增殖,一般需增加百分之十到百分之二十的血清,動物血清還可起到酸堿度緩沖液的效果。
怎么凍結血清才不會使它的質量受損呢?
首先將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8C冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必定要注意的是,溶解進程中必定要規矩地搖晃均勻以防止沉淀物的產生!小編下面就來具體介紹下辦法和過程:
防止產生沉淀物的辦法:
1、凍結血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。
2、凍結血清時,請依照所建議的逐步凍結法(-2℃至4℃至室溫),若血清凍結時改動的溫度太大(如-20℃至37℃),試驗顯現非常簡單產生沉淀物。
3、請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩定的成分也會因而受到危害,而影響血清的質量。
4、血清的熱滅活非常簡單形成沉淀物的增多,若非必要,能夠無須做此過程。
5、若必定要做血清的熱滅活,請恪守56℃,30分鐘的準則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會形成沉淀物的增多。
血清凍結后發現有絮狀沉淀物呈現,該怎么處理?欲去除這些絮狀沉淀物,能夠將血清分裝至無菌離心管內,以400g略微離心,上清液即可接著參加培養基內一同過濾。但不建議以過濾的辦法去除這些絮狀沉淀物,由于它可能會阻塞過濾膜。
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