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豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒運用雙抗體夾心ELISA酶聯(lián)免疫法定量測定血清、血漿或其它相關生物液體樣本中超氧化物歧化酶(SOD)的含量。
豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒的應用
用于電針耳穴對豚鼠老年性聾耳蝸核、下丘和聽皮層中SOD表達的影響研究
構建D-半乳糖老年性聾豚鼠模型,探討超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)在豚鼠老年性聾發(fā)病中的作用及電針耳穴對老年性聾的防治作用和機制。
方法:
采用成年雜色豚鼠(體重300550g)30只,隨機分成三組:對照組10只,D-半乳糖模型組10只,D-半乳糖+電針組10只。采用2年雜色豚鼠(體重600900g)10只作為老年組。豚鼠飼養(yǎng)一周后,D-半乳糖模型組給予D-半乳糖(300mg/kg)頸背部皮下注射,每日一次,連續(xù)六周;D-半乳糖+電針組給予等比例體重的D-半乳糖頸背部皮下注射,同時給予電針聽宮和翳風兩穴位,每日一次,連續(xù)六周;對照組給予等量生理鹽水頸背部皮下注射,每日一次,連續(xù)六周;老年組低噪聲環(huán)境下飼養(yǎng)。造模制備后于我科門診聽力學中心進行聽性腦干反應(ABR)測定后處死,取每組豚鼠的耳蝸核、下丘和聽皮層,考馬斯亮蘭測定蛋白含量,分光光度儀檢測上述組織中SOD的表達情況,計算SOD的活性。各組部分聽皮層迅速置于4%多聚甲醛液中固定,石蠟切片HE染色觀察各組中聽皮層神經(jīng)元的形態(tài)。數(shù)據(jù)采用方差分析方法進行統(tǒng)計學分析。
結果:
1.D-半乳糖模型組和老年組豚鼠均出現(xiàn)老化癥狀:聽力逐漸減退、食欲下降和脫毛等現(xiàn)象提示造模成功。
2. ABR測定結果:正常對照組的ABR閾值為39.00±7.38dB SPL.D-半乳糖模型組、D-半乳糖+電針組和老年組的ABR閾值分別79.44±6.62、70.00±5.88和81.88±4.43dB SPL(各實驗組和老年組與正常對照組比較,P<0.001)。
3.超氧化物歧化酶SOD活性測定:與正常對照組比較,D-半乳糖模型組和老年組,耳蝸核、下丘和聽皮層中SOD活性均下降,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01);與D-半乳糖模型組比較,D-半乳糖+電針組,三個部位的SOD活性均增高(P<0.01)。
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