牛白細胞介素6（IL-6）酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍：
96T
0.5ng/L - 17ng/L
使用目的：
本試劑盒用于測定牛血清、血漿及相關(guān)液體樣本中白細胞介素 6（IL-6）含量。
牛白細胞介素6（IL-6）酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中牛白細胞介素 6（IL-6）水平。用純化的牛白細
胞介素 6（IL-6）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入白細胞介
素 6（IL-6），再與 HRP標記的白細胞介素  6（IL-6）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復
合物，經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在   HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的
作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的白細胞介素 6（IL-6）呈正相關(guān)。用酶標
儀在 450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中牛白細胞介素   6（IL-6）
濃度。
試劑盒組成
標本要求
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因   NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
牛白細胞介素6（IL-6）酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書操作步驟
1.
標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
釋。
加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、
待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl，
然后再加待測樣品 10μl（樣品zui終稀釋度為 5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡
量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。
配液：將 30倍濃縮洗滌液用蒸餾水  30倍稀釋后備用
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30秒后棄去，如此
重復 5次，拍干。
加酶：每孔加入酶標試劑 50μl，空白孔除外。
溫育：操作同 3。
洗滌：操作同 5。
顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15分鐘.
10.終止：每孔加終止液    50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)）。
11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。測定應在加終止
液后 15分鐘以內(nèi)進行。
操作程序總結(jié)：
計算
以標準物的濃度為橫坐標， OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的
OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與  OD值計算出標