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3-羥-3-甲戊二酰輔酶AELISA試劑盒技術背景

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3-羥-3-甲戊二酰輔酶AELISA試劑盒技術背景:
甲戊二羥酸通路(mevalonate pathway),又稱為3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶通路或甲戊二羥酸依賴性通路,是所有高等真核生物和許多細菌具有的重要的細胞代謝通路,用于體內產生二甲基丙烯焦磷酸(dimethylallyl pyrophosphate;DMAPP)和異戊二烯焦磷酸(isopentenyl pyrophosphate;IPP)作為生物大分子合成的基礎,包括蛋白質異戊二烯化、細胞膜維護、激素合成、蛋白固著、蛋白糖化等。3-羥-3-甲戊二酰輔酶A還原酶(3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-CoA reductase;HMGR;EC1.1.1.34)是控制甲戊二羥酸通路的關鍵的酶,調節膽固醇和類異戊二烯脂分子的產生。HMG-COA還原酶位于內質網膜上,含有8個跨膜結構域,其中活性結構域在細胞漿里。HMG-COA還原酶是許多降脂藥物的靶標,包括lovastatin (Mevacor)、atorvastatin (Lipitor)、pravastatin(Pravachol)和simvastatin(Zocor)。在植物組織中,HMG-COA還原酶位于質體、線粒體和內質網上,含有2個跨膜結構域,組織發育、光照、病原菌感染、創傷等將誘導HMG-COA還原酶活性增加。在HMG-COA還原酶的催化下,將4個電子的3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原為甲戊二羥酸(mevalonate),同時產生還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate;NADPH)被氧化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(oxidized nicotinamide adenine dinucleotide phosphate;NADP),其氧化后的吸光峰值變化(340nm 波長),來定量分析3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶的活性。

3-羥-3-甲戊二酰輔酶AELISA試劑盒主要用途:
3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶活性直接光度法定量檢測試劑是一種旨在運用3-羥-3-甲戊二酰輔酶A作為底物,在還原酶的催化下,還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化后吸光峰值的降低,即采用光度法來測定植物裂解樣品中酶活性的而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種植物組織,包括種子(seed)、葉片(leaf)、根(root)、胚胎葉(cotyledon)、上胚軸(epicotyl)等裂解懸液、微粒體,或純化酶樣品3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶的活性檢測,以及抑制劑篩選。產品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩定。

3-羥-3-甲戊二酰輔酶AELISA試劑盒注意事項:
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

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