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魚雌激素ELISA試劑盒

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更新時間:2018-01-13 06:28:43瀏覽次數:602次

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基本方法一 用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
  1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為110μgml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml4℃過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。
  2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
  3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml37℃孵育0.51小時,洗滌。
  4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml371030分鐘。
  5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
  6. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+"、“-"號表示。也可測O·D值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔O·D值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

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ELISA試劑的臨床質量評價

ELISA試劑的評價(evaluation)分兩個方面:一是試劑本身的質量評價,符合一定要求后才能生產供應;一是在臨床應用中效果的評價。以肝炎ELISA診斷試劑為例,首先必須通過中國藥品生物制品檢定,以得到生產的許可。檢定內容除包裝、標簽、說明書等外,對試劑的性能,如特異性、靈敏度、精密度和線性等均需逐項檢定,通過對一系列參比品的檢測,結果符合要求者才為合格。ELISA試劑的臨床質量評價是用該試劑對臨床樣本進行檢測,以觀察其實際應用價值。部臨檢中心對乙肝ELISA診斷試劑在這方面進行了工作,通過質量評價,促進了試劑質量的提高。

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