小鼠*氨基甲酰轉移酶(OCT)ELISA Kit說明書酶標試劑盒操作中出現的問題:現象、可能原因和解決辦法:
1、 不同廠家生產的試劑盒因生產工藝和操作方法略有不同,務必按照所用試劑盒嚴格操作,否則容易產生檢測結果的不確定性.
2、 若不同批號試劑的不同組分(A液或酶工作液),或不同試劑的不同組分進行交叉使用,有可能出現顯色淺或本底高,花板等情形。
3、 加樣時樣品量誤差,對于陰或很陽的標本影響不大,但對閾值附近的標本影響*,建議校對加樣器。
4、 反應時間的誤差,做大量標本時,*孔和zui后一孔以及一些特殊標本可能影響較大。
5、 由于滴瓶的精密性肯定不如加樣器,不排除不同滴頭滴量的誤差。另外滴加過程中是否產生氣泡、速度是否均勻,是否顫動等影響液量的因素均可導致以上情況。高標準要求時應使用加樣器。
6、 閾值附近實際上是個灰區(gray scale),不能截然分為陰性、陽性,國外廠家均要求對這部分可疑標本進行奇數次復檢,以次數多者為準,如一次陽兩次陰zui后判為陰,但實際上是否為陰不好說,只有判為可疑,臨床上可以讓患者過一段時間后再測。
7、 肉眼觀察稍顯色,酶標儀打印為陰性的標本在實際工作中是難以避免的,肉眼目測結果不可靠,應以酶標儀判讀為準。
8、 由陰性變為強陽性原因多為操作過程中漏加試劑等有關。
9、 臨界值附近標本波動為正常現象,任何試劑均不可避免。可以考慮將標本做奇數次復檢。
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ELISA實驗操作注意事項:
大部分實驗室在使用酶標儀之前是通過目測判斷結果,操作過程隨意性較大,在使用酶標儀后操作必須規范:
A. 使用移液器加液,移液槍頭不能混用。
B. 洗板要干凈,避免交叉污染。
C. 嚴格按照試劑盒的說明書操作,反應時間準確。
D. 請勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內部,操作完成注意做好清潔工作。
E. 不要在測量過程中關閉電源。
F. 對于因試劑盒問題造成的測量結果的偏差,應根據實際情況及時修改參數,以達到*效果。
G. 使用后蓋好防塵罩。
H. 出現技術故障時應及時與廠家,切勿擅自拆卸酶標儀。
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