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生物實驗中玻璃儀器的洗滌步驟有:
1.常法洗滌儀器
洗刷儀器時,應首先將手用肥皂洗凈,免得手上的油污附在儀器上,增加洗刷的困難。如儀器長久存放附有塵灰,先用清水沖去,再按要求選用潔凈劑洗刷或洗滌。如用去污粉,將刷子蘸上少量去污粉,將儀器內外全刷一遍,再邊用水沖邊刷洗至肉眼看不見有去污粉時,用自來水洗3~6次,再用蒸餾水沖三次以上。一個細干凈的玻璃儀器,應該以掛不住水珠為度。如仍能掛住水珠,仍然需要重新洗滌。用蒸餾水沖洗時,要用順壁沖洗方法并充分震蕩,經蒸餾水沖洗后的儀器,用指示劑檢查應為中性。
2.作衡量金屬分析的玻璃儀器,使用1:1~1:9HNO3溶液浸泡,然后進行常法洗滌。
3.進行熒光分析時,玻璃儀器應避免使用洗衣粉洗滌(因洗衣粉中含有熒光增白劑,會給分析結果帶來誤差)。
4.分析致癌物質時,應選用適當洗消夜浸泡,然后再按常法洗滌。
生物實驗中玻璃儀器的洗滌要求有:
一、玻璃儀器的干燥
作實驗應經常要用到的儀器應在每次實驗完畢后洗凈干燥備用。用于不同實驗對干燥有不同的要求,一般定量分析用的燒杯、錐形瓶等儀器細凈即可使用,而用于食品分析的儀器很多要求是干燥的,有的要求無水痕,有的要求無水。應根據不同要求進行干燥儀器。
(1)晾干
不急等用的儀器,可在蒸餾水沖洗后在無塵處倒置處控去水分,然后自然干燥。可用安有木釘的架子或帶有透氣孔的玻璃柜放置儀器。
(2)烘干
洗凈的儀器控去水分,放在烘箱內烘干,烘箱溫度為105~110℃烘1小時左右。也可放在紅外燈干燥箱中烘干。此法適用于一般儀器。稱量瓶等在烘干后要放在干燥器中冷卻和保存。帶實心玻璃塞的及厚壁儀器烘干時要主義慢慢升溫并且溫度不可過高,以免破裂。量器不可放于烘箱中烘。
硬質試管可用酒精燈加熱烘干,要從底部烤起,把管口向下,以免水珠倒流把試管炸裂,烘到無水珠后把試管口向上趕凈水氣。
(3)熱(冷)風吹干
對于急于干燥的儀器或不適于放入烘箱的較大的儀器可用吹干的辦法。通常用少量乙醇、丙酮(或zui后再用乙醚)倒入已控去水分的儀器中搖洗,然后用電吹風機吹,開始用冷風吹1~2分鐘,當大部分溶劑揮發后吹入熱風至*干燥,再用冷風吹去殘余蒸汽,不使其又冷凝在容器內。
二、濕熱滅菌法
在同樣的溫度下,溫熱的殺菌效果比干熱好,其原因有:
三、濕熱滅菌法包括有:
(1)煮沸法:煮沸100℃,5分鐘,能殺死一般細菌的繁殖體。許多芽胞需經煮潮5~6小時才死亡。水中加入2%碳酸鈉,可提高其沸點達105℃。既可促進芽胞的殺滅,又能防止金屬器皿生銹。煮沸法可用于飲水和一般器械(刀剪、注射器等)的消毒。
(2)流通蒸汽滅菌法:利用100℃左右的水蒸汽進行消毒,一般采用流通蒸汽滅菌器(其原理相當于我國的蒸籠),加熱15到39分鐘,可殺死細菌繁殖體。消毒物品的包裝不宜過大、過緊以利于蒸汽穿透。
(3)間歇滅菌法:利用反復多次的流通蒸汽,以達到滅菌的目的。一般用流通蒸汽滅菌器,100℃加熱15~30分鐘,可殺死其中的繁殖體;但芽胞尚有殘存。取出后放37℃孵箱過夜,使芽胞發育成繁殖體,次日再蒸一次,如此連續三次以上。本法適用于不耐高溫的營養物(如血清培養基)的滅菌。
(4)巴氏消毒法(Pasteurization):利用熱力殺死液體中的病原菌或一般的雜菌,同時不致嚴重損害其質量的消耗方法。由巴斯德創用以消毒酒精類,故名。加溫61.1~62.8℃半小時,或71.7℃15~30秒鐘。常用于消毒牛奶和酒類等。
(5)高壓蒸汽滅菌法:壓力蒸汽滅菌是在專門的壓力蒸汽滅菌器中進行的,是熱力滅菌中使用zui普遍、效果zui可靠的一種方法。其優點是穿透力強,滅菌效果可靠,能殺滅所有微生物。
目前使用的壓力滅菌器可分為兩類:下排氣式壓力滅菌器和預真空壓力滅菌器。適用于耐高溫、耐水物品的滅菌。
四、干熱滅菌法
干熱滅菌比濕熱滅菌需要更高的溫度與較長的時間。
(1)干烤:利用干烤箱,加熱160~180℃2小時,可殺死一切微生物,包括芽胞菌。主要用于玻璃器皿、瓷器等的滅菌。
(2)燒灼和焚燒:燒灼是直接用火焰殺死微生物,適用于微生物實驗室的接種針等不怕熱的金屬器材的滅菌。焚燒是*的消毒方法,但只限于處理廢棄的污染物品,如無用的衣物、紙張、垃圾等。焚燒應在的焚燒爐內進行。
(3)紅外線:紅外線輻射是一種0.77~1000微米波長的電磁波,有較好的熱效應,尤以1~10微米波長的熱效應zui強。亦被認為一種干熱滅菌。紅外線由紅外線燈泡產生,不需要經空氣傳導,所以加熱速度快,但熱效應只能在照射到的表面產生,因此不能使一個物體的前后左右均勻加熱。紅外線的殺菌作用與干熱相似,利用紅外線烤箱滅菌的所需溫度和時間亦同于干烤。多用于醫療器械的滅菌。
人受紅外線照射較長會感覺眼睛疲勞及頭疼;長期照射會造成眼內損傷。因此,工作人至少應戴能防紅外線傷害的防護鏡。
(4)微波:微波是一種波長為1毫米到1米左右的電磁波,頻率較高,可穿透玻璃、塑料薄膜與陶瓷等物質,但不能穿透金屬表面。微波能使介質內雜亂無章的極性分子在微波場的作用下,按波的頻率往返運動,互相沖撞和磨擦而產生熱,介質的溫度可隨之升高,因而在較低的溫度下能起到消毒作用。一般認為其殺菌機理除熱效應以外,還有電磁共振效應,場致力效應等的作用。消毒中常用的微波有2450MHZ與915MHZ兩種。微波照射多用于食品加工。在醫院中可用于檢驗室用品、非金屬器械、無菌病室的食品食具、藥杯及其它用品的消毒。
微波長期照射可引起眼睛的晶狀混濁、睪丸損傷和神經功能紊亂等全身性反應,因此必須關好門后才開始操作。
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