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大鼠AMP激活蛋白激酶β1(PRKAβ1) ELISA Kit
大鼠肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒使用范圍:僅供科研使用,不得用于臨床
本試劑僅供研究使用 目的:本試劑盒用于測定血清,血漿及相關液體樣本中含量。
實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中水平。用純化的本產品抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入本產品抗原,再與HRP標記的大鼠肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒本產品抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的本產品呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中濃度。
試劑盒組成:
試劑盒組成 48孔配置 96孔配置 保存
說明書 1份 1份
封板膜 2片(48) 2片(96)
密封袋 1個 1個
酶標包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
標準品:1800ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
標準品稀釋液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存
酶標試劑 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
樣品稀釋液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
顯色劑A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
顯色劑B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
終止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
濃縮洗滌液 (20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃保存
標本要求:
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟:
1.標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在*、第二孔中分別加標準品100μl,然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1200 ng/L,800 ng/L ,400 ng/L,200ng/L, 100 ng/L)。
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
注意事項:
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,使用排搶加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
計算:
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,
在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD
值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋
倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標
準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值
代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋
倍數,即為樣品的實際濃度。
試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.95以上。
2.批內與批見應分別小于9%和11%
大鼠肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒保存條件及有效期:
1.試劑盒保存;2-8℃。
2.有效期:6個月
代理品牌產品* 美國MP Biomedicals 500 g 齊一生物 Vanillin 121-33-5
* 美國MP Biomedicals 1 kg 齊一生物 Vanillin 121-33-5
* 美國MP Biomedicals 25 g 齊一生物 o-Vanillin 148-53-8
* 美國MP Biomedicals 500 g 齊一生物 o-Vanillin 148-53-8
麥角固醇 美國MP Biomedicals 1 g 齊一生物 Viosterol 57-87-4
麥角固醇 美國MP Biomedicals 5 g 齊一生物 Viosterol 57-87-4
麥角固醇 美國MP Biomedicals 25 g 齊一生物 Viosterol 57-87-4
維生素 B12 美國MP Biomedicals 1 g 齊一生物 Vitamin B12 68-19-9
維生素D3, 9,10-開環膽甾-5,7,10(19)-三烯-3beta-醇 02101224.2 美國MP Biomedicals 250 mg 齊一生物 Vitamin D3 67-97-0
維生素D3, 9,10-開環膽甾-5,7,10(19)-三烯-3beta-醇 美國MP Biomedicals 5 g 齊一生物 Vitamin D3 67-97-0
維生素D3, 9,10-開環膽甾-5,7,10(19)-三烯-3beta-醇 美國MP Biomedicals 100 g 齊一生物 Vitamin D3 Powder 67-97-0
氧雜蒽 0521981280 美國MP Biomedicals 100 g 齊一生物 Xanthene 92-83-1
黃嘌呤 美國MP Biomedicals 5 g 齊一生物 Xanthine 69-89-6
黃嘌呤氧化酶,來源于牛奶 美國MP Biomedicals 25 units 齊一生物 Xanthine Oxidase From Bovine Milk 9002-17-9
黃嘌呤氧化酶,來源于牛奶 美國MP Biomedicals 50 units 齊一生物 Xanthine Oxidase From Bovine Milk 9002-17-9
"2,3-雙(2-甲氧基-4-硝基-5-磺苯基)-2H-四唑-5-甲酰胺內鹽 內鹽 (XTT)
" 美國MP Biomedicals 100 mg 齊一生物 XTT 111072-31-2
對二甲苯 02158696.5 美國MP Biomedicals 500 ml 齊一生物 p-Xylene 106-42-3
對二甲苯 美國MP Biomedicals 4 L 齊一生物 p-Xylene 106-42-3
對二甲苯 美國MP Biomedicals 1 L 齊一生物 p-Xylene 106-42-3
對二甲苯 美國MP Biomedicals 4x4 L 齊一生物 p-Xylene 106-42-3
對二甲苯 美國MP Biomedicals 6x1 L 齊一生物 p-Xylene 106-42-3
4-甲基酚 美國MP Biomedicals 100 g 齊一生物 p-Xylene 106-44-5
鄰甲酚 0520793580 美國MP Biomedicals 100 g 齊一生物 o-Xylene 95-48-7
鄰二甲苯 02158694.5 美國MP Biomedicals 500 ml 齊一生物 o-Xylene 95-47-6
鄰二甲苯 美國MP Biomedicals 4 L 齊一生物 o-Xylene 95-47-6
鄰二甲苯 美國MP Biomedicals 1 L 齊一生物 o-Xylene 95-47-6
鄰二甲苯 美國MP Biomedicals 6x1 L 齊一生物 o-Xylene 95-47-6
鄰二甲苯 美國MP Biomedicals 4x4 L 齊一生物 o-Xylene 95-47-6
二甲苯青FF 0521281710 美國MP Biomedicals 10 g 齊一生物 Xylene Cyanol FF 2650-17-1
木糖醇 0521991601 美國MP Biomedicals 1 g 齊一生物 D-Xylitol 87-99-0
木糖, 五碳醛糖 美國MP Biomedicals 100 g 齊一生物 D-(+)-Xylose 58-86-6
木糖, 五碳醛糖 美國MP Biomedicals 500 g 齊一生物 D-(+)-Xylose 58-86-6
木糖, 五碳醛糖 美國MP Biomedicals 1 kg 齊一生物 D-(+)-Xylose 58-86-6
溴化鋅 美國MP Biomedicals 100 g 齊一生物 Zinc Bromide 7699-45-8
溴化鋅 美國MP Biomedicals 500 g 齊一生物 Zinc Bromide 7699-45-8
氯化鋅 美國MP Biomedicals 100 g 齊一生物 Zinc Chloride, ACS 7646-85-7
氯化鋅 美國MP Biomedicals 500 g 齊一生物 Zinc Chloride, ACS 7646-85-7
氯化鋅 美國MP Biomedicals 1 kg 齊一生物 Zinc Chloride 7646-85-7
鋅礬,七水硫酸鋅 02199651.1 美國MP Biomedicals 100 g 齊一生物 Zinc Sulfate, U.S.P. 7446-20-0
酵母聚糖A,來源于釀酒酵母 02101237.2 美國MP Biomedicals 250 mg 齊一生物 Zymosan A 58856-93-2
酵母聚糖A,來源于釀酒酵母 美國MP Biomedicals 1 g 齊一生物 Zymosan A 58856-93-2
酵母聚糖A,來源于釀酒酵母 美國MP Biomedicals 5 g 齊一生物 Zymosan A 58856-93-2
A-萘酚 0520418901 美國MP Biomedicals 1 g 齊一生物 Α-Naphthol 90-15-3
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