人解整合素樣金屬蛋白酶33(ADAM33)ELISA試劑盒
規    格：96T/48T
檢測標本：血清，血漿，尿液，胸腹水，腦脊液，細胞培養上清，組織勻漿等
檢測方法：ELISA
檢測類型：酶聯免疫夾心法
產品的用途：僅供科研課題使用齊一生物科技（上海）有限公司提供ELISA試劑盒受到了廣大科研單位*肯定和認同。*保證，價格公道

人解整合素樣金屬蛋白酶33(ADAM33)ELISA試劑盒FOR RESEARCH USE ONLY

Drug Names

Generic Name：人解整合素樣金屬蛋白酶33(ADAM33)ELISA試劑盒

      This kit can be used for determination of serum, plasma and liquid samples Organization Content.

The experimental principle:

The product levels were measured in samples of the kit by double antibody sandwichmethod. The product with the purified antibody coated microtiter plate, made of solid phase antibody, to package is the product antigen monoclonal antibodies are then added to the micropores, the product and then with HRP labeled antibody binding, the formation of antibody - antigen - antibody complex enzyme label, after thorough washing with TMB chromogenic substrate. TMB in the HRP enzyme catalytic conversion into the blue, and in the action of acid into the final yellow. This product is positively related to the depth of color and in the samples. Instrument measured absorbance in the 450nm wavelength with ELISA (OD), the product concentration in the samples was calculated by standard curve.

Materials provided with the kit

Specimen requirements

• serum- coagulation at room temperature 10-20 mins，centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.
• plasma-use suited EDTA or citrate plasma as an anticoagulant,mix 10-20 mins ,centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.
• Urine-collect sue a sterile container, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again. The Operation of Hydrothorax and cerebrospinal fluid Reference to it.
• cell culture supernatant-detect secretory components, collect sue a sterile container, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant,detect the composition of cells, Dilut cell suspension with PBS（PH7.2-7.4）, Cell concentration reached 1 million / ml, repeated freeze-thaw cycles, damage cells and release of intracellular components, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.
• Tissue samples- After cutting samples, check the weight,add PBS（PH7.2-7.4）, Rapidly frozen with liquid nitrogen, maintain samples at 2-8℃ after melting,add PBS（PH7.4）, Homogenized by hand or Grinders, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant.
• extract as soon as possible after Specimen collection,and according to the relevant literature, and should be experiment as soon as possible after the extraction. If it can’t, specimen can be kept in -20 ℃ to preserve, Avoid repeated freeze-thaw cycles.
• Can’t detect the sample which contain NaN3, because NaN3 inhibits HRP active.

人解整合素樣金屬蛋白酶33(ADAM33)ELISA試劑盒Assay procedure

1.Dilute and add sample to Standard: set 10 Standard wells on the ELISA plates coated, add Standard 100μl to the first and the second well, then add Standard dilution 50μl to the first and the second well, mix; take out 100μl form the first and the second well then add it to the third and the forth well separay. then add Standard dilution 50μl to the third and the forth well ,mix ; then take out 50μl from the third and the forth well discard, add 50μl to the fifth and the sixth well ,then add Standard dilution 50μl to the fifth and the sixth well, mix ; take out 50μl from the fifth and the sixth well and add to the seventh and the eighth well, then add Standard dilution 50μl to the seventh and the eighth well ,mix ; take out 50μl from the seventh and the eighth well and add to the ninth and the tenth well, add Standard dilution 50μl to the ninth and the tenth well, mix , take out 50μl from the ninth and the tenth well discard(add Sample 50μl to each well after Diluting ,(density: 240ng/L,160ng/L ,80ng/L,40ng/L, 20ng/L)

2.add sample：Set blank wells separay (blank comparison wells don’t add sample and HRP-人解整合素樣金屬蛋白酶33(ADAM33)ELISA試劑盒Conjugate reagent, other each step operation is same). testing sample well. add Sample dilution 40μl to testing sample well, then add testing sample 10μl (sample final dilution is 5-fold), add sample to wells , don’t touch the well wall as far as possible, and Gently mix.

3.Incubate: After closing plate with Closure plate membrane ,incubate for 30 min at 37℃.

4.Configurate liquid: 30-fold (or 20-fold)wash solution diluted 30-fold (or 20-fold) with distilled water and reserve.

5.washing：Uncover Closure plate membrane, discard Liquid, dry by swing, add washing buffer to every well, still for 30s then drain, repeat 5 times, dry by pat.

人解整合素樣金屬蛋白酶33(ADAM33)ELISA試劑盒6.add enzyme：Add HRP-Conjugate reagent 50μl to each well, except  blank well. 

7.incubate：Operation with 3.

8.washing：Operation with 5.

9.color：Add Chromogen Solution A 50ul and Chromogen Solution B to each well, evade the light preservation for 15 min at 37℃

10.Stop the reaction：Add Stop Solution50μl to each well, Stop the reaction(the blue color change to yellow color).

11.assay：take blank well as zero , Read absorbance at 450nm after Adding Stop Solution and within 15min.

Important notes

• The kit takes out from the refrigeration environment should be balanced 15-30 minutes in the room temperature, ELISA plates coated if has not use up after opened, the plate should be stored in Sealed bag.
• washing buffer will Crystallization separation, it can be heated the water helps dissolve when dilute . Washing does not affect the result.
• add Sample with sampler Each step, And proofread its accuracy frequently, avoids the experimental error. add sample within 5 mins, if the number of sample is much , recommend to use Volley .
• if the testing material content is excessively higher (The sample OD is bigger than the first standard well ),please dilute Sample (n-fold), Please diluente and multiplied by the dilution factor.（×n×5）.
• Closure plate membrane only limits the disposable use, to avoid cross-contamination.
• The substrate evade the light preservation.
• Please according to use instruction strictly, The test result determination must take the microtiter plate reader as a standard.
• All samples, washing buffer and each kind of reject should according to infective material process.
• Do not mix reagents with those from other lots.

Calculate：

Take the standard density as the horizontal, the OD value for the vertical ,draw the standard curve on graph paper, Find out the corresponding density according to the sample OD value by the Sample curve, multiplied by the dilution multiple, or calculate the straight line regression equation of the standard curve with the standard density and the OD value ,with the sample OD value in the equation, calculate the sample density, multiplied by the dilution factor, the result is the sample actual density.

Storage and validity

1．Storage：  2-8℃.

2．validity： six months.

其它產品：

Na-對甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯鹽酸鹽    Na-P-甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯鹽酸鹽；TAME    BR，98%    1克    1784-03-8    2～8℃，避光
            5克        
            25克        
Na-對甲苯磺酰-L-賴氨酸氯甲基酮鹽酸鹽    （3S）-1-氯-3-甲苯磺酰基氨-7-氨基-2-庚酮鹽酸鹽；Nα-甲苯磺胺基-L-賴氨酸氯甲基酮鹽酸鹽；TLCK    BR，96%    50毫克    4272-74-6    保存：-20℃
Na-對甲苯磺酰-L-苯氯甲基酮    L-1,4'-甲基磺酰基-2-苯基乙基氯甲基酮；(S)-1-氯-3-磺酰胺基-4-苯基-2-丁酮；(S)-1-氯-4-苯基-3-磺酰氨基-2-丁酮；甲苯磺酰基-L-氨基聯苯氯甲基酮；TPCK    97%    100毫克    402-71-1    2～8℃
            250毫克        
            1克        
N-叔丁氧羰酰-L-白氨酸酰甘氨酰-L-精氨酸對硝基苯酰胺鹽酸鹽    鱟試劑三肽；BOC-Leu-Gly-Arg•Pna•HC1    BR，98%    50毫克        2～8℃，避光
            500毫克        
            1克        
叔丁基苯乙腈肟碳酸酯    2-(叔-丁氧基碳酰胺)-2-苯乙腈；2-(叔丁氧基羰基氧代亞氨基)-2-苯乙腈；2-(叔丁氧羰基氧亞氨基)-2-苯乙腈；2-(叔丁氧羰基氧亞氨基)-2-苯基乙腈；BOC-ON    BR，99%    5克    58632-95-4    RT
            25克        
            100克        
1-羥基苯并三氮唑一水物    對羥基苯三唑一水；1-羥基苯駢三氮唑一水；1-羥基苯并三唑一水；HOBT    BR，99%    25克    123333-53-9    RT
            100克        
            250克        
            1公斤        
N-羥基琥珀酰亞胺    N-羥基丁二酰亞胺；HOSU；NHS    BR，99%    25克    6066-82-6    RT
            100克        
            500克        
γ-氨基丁酸    4-氨基丁酸；氨酪酸；氨酷酸；丁氨酸；GABA    BR，99%    10克    CAS:56-12-2    RT，避光
            25克        
            100克        
            500克        
γ-L-谷氨酰-α-萘酰胺    γ-L-谷氨酰-1-萘酰胺；N-(γ-L-谷氨酰)-1-萘胺；L-谷氨酰-1-萘胺；γ-L-谷氨酰-α-萘胺；γ-L-Glutamyl-α-naphthylamide    BR，98%    1克    81012-91-1    2～8℃，避光
γ-L-谷氨酰-β-萘酰胺    γ-L-谷氨酰-2-萘酰胺；N-(L-谷氨酰基)-β-萘胺；L-谷氨酰-2-萘胺；N-(L-谷氨酰基)-β-萘胺；γ-L-谷氨酰-β-萘酰胺；γ-L-Glutamyl-β-naphthylamide    BR，98%    100毫克    14525-44-1    2～8℃，避光
            1克        
γ-L-谷氨酰對硝基苯胺一水合物    L-谷氨酰基-4-硝基苯胺；L-γ-谷氨酰-對硝基苯胺；γ-L-谷氨酰基-4-硝基苯胺；GPNA；H-Glu-PNA    BR，98%    1克    7300-59-6    2～8℃，避光
γ-谷氨酰-3-羥基-4-硝基苯胺單胺鹽    γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺單鹽；L-Glutamic acid γ-(3-carboxy-4-nitroanilide) ammonium salt    BR，98%    250毫克    63699-78-5    2～8℃
            1克        
氧化型谷胱甘肽    N-(N-L-γ-谷胺酰基-L-半胱胺酰基)甘氨酸-2,2-二硫化物；L-谷胱甘肽(氧化型)；氧化谷胱甘肽；GSSG    BR，98%    1克    27025-41-8    RT
            10克        
            25克        
            100克        
還原型谷胱甘肽    L-還原型谷胱甘肽；5-L-谷氨酰-L-半胱氨酰甘氨酸；GSH    BR，99%    1克    70-18-8    RT
            5克        
            25克        
            100克        
磷酸組胺    組胺磷酸鹽；二磷酸組織胺；二磷酸組胺；磷酸組織胺；組織胺二磷酸鹽；Histamine diphospate    BR，98%    5克    51-74-1    2～8℃，避光
            25克        
            100克        
            500克        
組胺    2-咪唑基乙胺；組織胺；β-氨乙基咪唑；β-氨乙基甘噁啉；1H-咪唑-4-乙胺；Histamine    BR，98%    1克    51-45-6    2～8℃，避光
            5克        
組胺二鹽酸鹽    組胺雙鹽酸鹽；二鹽酸組胺；二鹽酸-1H-咪唑-4-乙胺；2-(4-咪唑基)乙胺二鹽酸鹽；二鹽酸-β-氨乙基甘惡啉；二鹽酸組織胺；Histamine dihydrochloride    BR，99%    5克    56-92-8    2～8℃，避光
            25克        
            100克        
            500克        
L-肌肽    N-β-丙氨酰-L-組氨酸；β-氨基-L-丙酰組氨酸；L-肉縮氨基酸；L-肉縮酸；β-丙氨酰-L-組氨酸；L-Carnosine    BR，99%    1克    305-84-0    RT，避光
            5克        
            25克        
            100克        
            500克        
L-多巴    3-羥基-L-酪氨酸；；L-β-(3,4-二羥基苯)；L-3-(3,4-二羥基苯)；左多巴；3-（3，4-二羥基苯）-L-；β-［3,4-二羥苯基］L-初油氨基酸；L-Dopa    BR，98%    10克    59-92-7    2～8℃，避光
            25克        
            100克        
            500克        
L-甲狀腺素    O-(4-羥基-3,5-二碘苯基)-3,5-二碘-L-酪氨酸；3,5,3′,5′-四碘-L-甲狀腺原氨酸；3-[4-(4-羥基-3,5-二碘苯氧基)-3,5-二碘苯基]-L-；2-甲狀腺素；L-β-(3,5-二磺-4-羥基苯氧基)-3,5-二磺苯；左甲狀腺素；T4    BR，98%    1克    51-48-9    2～8℃，避光
            5克        
            25克        
L-甲狀腺素鈉五水物    (2S)-2-氨基-3-[4-(4-羥基-3,5-二碘-苯氧基)-3,5-二碘苯基]丙酸鈉；L-甲狀腺胺鈉；3,5,3′,5′-四碘甲狀腺-L-原氨酸鈉；左旋甲狀腺素鈉；L-膩，3'，5'-四碘甲狀腺氨酸鈉/3',3,5',5-四碘甲腺原氨酸鈉鹽五水合物；O-(4-羥基-3,5-二碘苯基)-3,5-二碘-L-酪氨酸單鈉鹽五水合物；L-thyroxine sodium    BR，97%    1克    CAS:6106-07-6    2～8℃，避光
S-羧甲基-L-半胱氨酸    羧甲司坦；S-羧甲基半胱氨酸；S-Carboxymethyl-L-Cysteine    BR，99%    5克    638-23-3    RT
            25克        
            100克        
            500克        
N-乙酰-L-谷氨酰胺    α-乙酰-L-谷氨酰胺；N-乙酰基-L-谷氨酸；乙酰谷氨酰胺；N-α-乙酰基-L-谷氨酸鹽；N-α-乙酰-L-谷氨酸；N-Acetyl-L-Glutamine    BR，98%    5克    2490-97-3    RT
            25克        
            100克        
            500克        
L-甘-酪二肽    甘氨酰-L-酪氨酸；Glycyl-L-Tryosine    BR，98%    1克    658-79-7    RT
            5克        
            25克        
一水肌酸    肌酸；N-甲基胍基乙酸；胍基醋酸；肌肉素；肌氨基酸；甲胍基醋酸；Creatine MonohydQYRBte    BR，99%    5克    6020-87-7    RT
            25克        
            100克        
            500克        
肌酐    肌酸酐；肌氨基酐；2-氨基-1-甲基咪唑啉-4-酮；縮水肌肉素；2-氨基-1,5-二氫-1-甲基-4H-咪唑啉-4-酮；1-甲基乙內酰脲-2-酰亞胺；Creatinine    BR，99%    5克    60-27-5    RT
            25克        
            100克        
            500克