豬白介素10(IL-10)ELISA 試劑盒 
規(guī)    格：96T/48T
檢測標(biāo)本：血清，血漿，尿液，胸腹水，腦脊液，細(xì)胞培養(yǎng)上清，組織勻漿等
檢測方法：ELISA
檢測類型：酶聯(lián)免疫夾心法
產(chǎn)品的用途：僅供科研課題使用齊一生物科技（上海）有限公司專業(yè)經(jīng)營ELISA試劑盒種類齊全，到貨快、確保每一個(gè)ELISA試劑盒質(zhì)量。

豬白介素10(IL-10)ELISA 試劑盒 FOR RESEARCH USE ONLY

Drug Names

Generic Name：豬白介素10(IL-10)ELISA 試劑盒 

      This kit can be used for determination of serum, plasma and liquid samples Organization Content.

The experimental principle:

The product levels were measured in samples of the kit by double antibody sandwichmethod. The product with the purified antibody coated microtiter plate, made of solid phase antibody, to package is the product antigen monoclonal antibodies are then added to the micropores, the product and then with HRP labeled antibody binding, the formation of antibody - antigen - antibody complex enzyme label, after thorough washing with TMB chromogenic substrate. TMB in the HRP enzyme catalytic conversion into the blue, and in the action of acid into the final yellow. This product is positively related to the depth of color and in the samples. Instrument measured absorbance in the 450nm wavelength with ELISA (OD), the product concentration in the samples was calculated by standard curve.

Materials provided with the kit

Specimen requirements

• serum- coagulation at room temperature 10-20 mins，centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.
• plasma-use suited EDTA or citrate plasma as an anticoagulant,mix 10-20 mins ,centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.
• Urine-collect sue a sterile container, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again. The Operation of Hydrothorax and cerebrospinal fluid Reference to it.
• cell culture supernatant-detect secretory components, collect sue a sterile container, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant,detect the composition of cells, Dilut cell suspension with PBS（PH7.2-7.4）, Cell concentration reached 1 million / ml, repeated freeze-thaw cycles, damage cells and release of intracellular components, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.
• Tissue samples- After cutting samples, check the weight,add PBS（PH7.2-7.4）, Rapidly frozen with liquid nitrogen, maintain samples at 2-8℃ after melting,add PBS（PH7.4）, Homogenized by hand or Grinders, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant.
• extract as soon as possible after Specimen collection,and according to the relevant literature, and should be experiment as soon as possible after the extraction. If it can’t, specimen can be kept in -20 ℃ to preserve, Avoid repeated freeze-thaw cycles.
• Can’t detect the sample which contain NaN3, because NaN3 inhibits HRP active.

Assay procedure

1.Dilute and add sample to Standard: set 10 Standard wells on the ELISA plates coated, add Standard 100μl to the first and the second well, then add Standard dilution 50μl to the first and the second well, mix; take out 100μl form the first and the second well then add it to the third and the forth well separay. then add Standard dilution 50μl to the third and the forth well ,mix ; then take out 50μl from the third and the forth well discard, add 50μl to the fifth and the sixth well ,then add Standard dilution 50μl to the fifth and the sixth well, mix ; take out 50μl from the fifth and the sixth well and add to the seventh and the eighth well, then add Standard dilution 50μl to the seventh and the eighth well ,mix ; take out 50μl from the seventh and the eighth well and add to the ninth and the tenth well, add Standard dilution 50μl to the ninth and the tenth well, mix , take out 50μl from the ninth and the tenth well discard(add Sample 50μl to each well after Diluting ,(density: 240ng/L,160ng/L ,80ng/L,40ng/L, 20ng/L)

2.add sample：Set blank wells separay (blank comparison wells don’t add sample and HRP-Conjugate reagent, other each step operation is same). testing sample well. add Sample dilution 40μl to testing sample well, then add testing sample 10μl (sample final dilution is 5-fold), add sample to wells , don’t touch the well wall as far as possible, and Gently mix.

3.Incubate: After closing plate with Closure plate membrane ,incubate for 30 min at 37℃.

4.Configurate liquid: 30-fold (or 20-fold)wash solution diluted 30-fold (or 20-fold) with distilled water and reserve.

5.washing：Uncover Closure plate membrane, discard Liquid, dry by swing, add washing buffer to every well, still for 30s then drain, repeat 5 times, dry by pat.

6.add enzyme：Add HRP-Conjugate reagent 50μl to each well, except  blank well. 

7.incubate：Operation with 3.

8.washing：Operation with 5.

9.color：Add Chromogen Solution A 50ul and Chromogen Solution B to each well, evade the light preservation for 15 min at 37℃

10.Stop the reaction：Add Stop Solution50μl to each well, Stop the reaction(the blue color change to yellow color).

11.assay：take blank well as zero , Read absorbance at 450nm after Adding Stop Solution and within 15min.

豬白介素10(IL-10)ELISA 試劑盒 Important notes

• The kit takes out from the refrigeration environment should be balanced 15-30 minutes in the room temperature, ELISA plates coated if has not use up after opened, the plate should be stored in Sealed bag.
• washing buffer will Crystallization separation, it can be heated the water helps dissolve when dilute . Washing does not affect the result.
• add Sample with sampler Each step, And proofread its accuracy frequently, avoids the experimental error. add sample within 5 mins, if the number of sample is much , recommend to use Volley .
• if the testing material content is excessively higher (The sample OD is bigger than the first standard well ),please dilute Sample (n-fold), Please diluente and multiplied by the dilution factor.（×n×5）.
• Closure plate membrane only limits the disposable use, to avoid cross-contamination.
• The substrate evade the light preservation.
• Please according to use instruction strictly, The test result determination must take the microtiter plate reader as a standard.
• All samples, washing buffer and each kind of reject should according to infective material process.
• Do not mix reagents with those from other lots.

豬白介素10(IL-10)ELISA 試劑盒 Calculate：

Take the standard density as the horizontal, the OD value for the vertical ,draw the standard curve on graph paper, Find out the corresponding density according to the sample OD value by the Sample curve, multiplied by the dilution multiple, or calculate the straight line regression equation of the standard curve with the standard density and the OD value ,with the sample OD value in the equation, calculate the sample density, multiplied by the dilution factor, the result is the sample actual density.

豬白介素10(IL-10)ELISA 試劑盒 Storage and validity

1．Storage：  2-8℃.

2．validity： six months.

其它產(chǎn)品

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RNA-EZ Reagents L RNA-In-Safe RNA保存液    /    1.5ml
RNA-EZ Reagents M DNA-Be-Gone-A 非酶DNA清除劑-A    /    1.5ml
RNA-EZ Reagents N DNA-Be-Gone-B 非酶DNA清除劑-B    /    1set
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細(xì)胞分離液1.068-1    /    200ml
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細(xì)胞分離液1.068    /    200ml
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普通級馬血清    /    500ml
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BamHI 核酸內(nèi)切酶        2000U
EcoRV 核酸內(nèi)切酶        2000U
AatII 核酸內(nèi)切酶    /    300U
AlfI 核酸內(nèi)切酶    /    50U
Alw44I 核酸內(nèi)切酶    /    1,000U
BamHI 核酸內(nèi)切酶    /    2,000U
BfiI 核酸內(nèi)切酶    /    50U
        
6 x Glycerol Gel Loading Buffer without Dye 緩沖液    /    1ml
2 x miRNA Loading Dye 緩沖液    /    1ml
6 x Ficoll Loading Dye EB 緩沖液    /    1ml
2 x SSCP Loading Dye 緩沖液    /    1ml
6 x Glycerol Gel Loading Dye I (BPB) 緩沖液    /    1ml
6 x Glycerol Gel Loading Dye II (Xylene cyanol & BPB) 緩沖液    /    1ml
6 x Glycerol Gel Loading Dye III (Xylene cyanol & BPB & Orange G) 緩沖液    /    1ml
6 x Glycerol Gel Loading Dye Orange (Xylene cyanol & Orange G) 緩沖液    /    1ml
6 x Glycerol Gel Loading Dye Tartrazine (Xylene cyanol & Tartrazine) 緩沖液    /    1ml
6 x Glycerol Gel Loading Dye SDS (Xylene cyanol & BPB) 緩沖液    /    1ml
6 x Sucrose Gel Loading Buffer without Dye 緩沖液    /    1ml
6 x Sucrose Gel Loading Dye I (BPB) 緩沖液    /    1ml
6 x Sucrose Gel Loading Dye II (Xylene cyanol & BPB) 緩沖液    /    1ml
6 x Sucrose Gel Loading Dye III (Xylene cyanol & BPB & Orange G) 緩沖液    /    1ml
6 x Sucrose Gel Loading Dye Orange (Xylene cyanol & Orange G) 緩沖液    /    1ml
6 x Sucrose Gel Loading Dye Tartrazine (Xylene cyanol & Tartrazine) 緩沖液    /    1ml
6 x Sucrose Gel Loading Dye SDS (Xylene cyanol & BPB) 緩沖液    /    1ml
6 x Ficoll Loading Dye II (Xylene cyanol & BPB) 緩沖液    /    1ml
2 x RNA Loading Dye without EB 緩沖液    /    1ml
2 x RNA Loading Dye with EB 緩沖液    /    1ml
10x Tris-Tricine-SDS buffer 緩沖液    /    500ml
TBS buffer with BSA 緩沖液    /    1pk
TBS buffer with non-fat powdered milk 緩沖液    /    1pk
Microarray Hybridization Buffer 0.1 x SSPE Buffer With 0.2% SDS Chloride concentration 14-16 mM SDS 0.19-0.21% 緩沖液    /    250ml
TBS buffer with TWEEN-20 緩沖液    /    1pk
1´ TE buffer 緩沖液    /    500ml
10x TG buffer solution 緩沖液    /    500ml
TG buffer Premixed Powder 緩沖液    /    1pk
TG-SDS buffer ( Tris-glycine-SDS) Premixed Powder 緩沖液    /    1pk
1X GTE buffer (Glucose-Tris-EDTA) 緩沖液    /    500ml
1x HBSS Hanks’ balanced salt solution： 緩沖液    /    1PK
2xHEPES 緩沖液    /    100ml
Microarray Hybridization Buffer 1 x SSC Buffer With 0.1% SDS 緩沖液    /    250ml
Microarray Hybridization Buffer 6 x SSC Buffer With 0.2% SDS 緩沖液    /    250ml
Microarray Hybridization Buffer 0.1 x SSC Buffer With 0.2% SDS Chloride concentration 14-16 mM SDS 0.19-0.21% 緩沖液    /    250ml
5´ TBE buffer 緩沖液    /    500ml
10x TBE Premixed Powder 緩沖液    /