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卡邁舒(上海)生物科技有限公司
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更新時間:2017-07-18 20:38:37瀏覽次數:201次
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卡邁舒(上海)生物科技有限公司專業(yè)提供人抗天然脫氧核糖核酸抗體(n-DNA-Ab)ELISA試劑盒,種屬齊全,指標成千上萬種,質量好發(fā)貨及時,穩(wěn)定的重復性和可靠高,特異性強,優(yōu)秀的技術團隊竭誠為您服務,為全國科研機構、高校和科研人員提供優(yōu)質產品,在保證產品質量的同時,我司還配有扎實的售后技術咨詢和服務,咨詢。
人抗天然脫氧核糖核酸抗體(n-DNA-Ab)ELISA試劑盒組成
1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶
2 酶標試劑 6ml×1 瓶 8 陽性對照 0.5ml×1 瓶
3 酶標包被板 12 孔×8 條 9 陰性對照 0.5ml×1 瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說明書 1 份
5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 張
6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 個
標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
人抗天然脫氧核糖核酸抗體(n-DNA-Ab)ELISA試劑盒操作步驟
1. 編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照2 孔、陽性對照2 孔、空白對照1
孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2. 加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先
加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不
觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此
重復5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
10 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止
液后15 分鐘以內進行。
操作程序總結:
計算和結果判定:
試驗有效性:陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10
臨界值(CUT OFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
陰性判定:樣品OD 值< 臨界值(CUT OFF)者為陰性
陽性判定:樣品OD 值≥ 臨界值(CUT OFF)者為陽性
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