谷丙轉氨酶（ALT)elisa原理說明 廣銳生物-國內高、優Elisa試劑盒供應商

用于測定小鼠血清，血漿及相關液體樣本中谷丙轉氨酶（ALT)的含量。
實驗原理：
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠谷丙轉氨酶（ALT)水平。用純化的小鼠谷
丙轉氨酶（ALT)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入谷丙轉氨
酶（ALT)，再與HRP 標記的谷丙轉氨酶（ALT)體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，
經過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下
轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的谷丙轉氨酶（ALT)呈正相關。用酶標儀在450nm
波長下測定吸光度（OD 值），通過標準曲線計算樣品中小鼠谷丙轉氨酶（ALT)濃度。

谷丙轉氨酶（ALT)elisa原理說明

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樣本處理及要求：
1.血清：室溫血液自然凝固10-20 分鐘，離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上
清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。
2.血漿：應根據標本的要求選擇EDTA、者檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20 分鐘后，
離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再
次離心。
3.尿液：用無菌管收集，離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清，保存過程中
如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4.細胞培養上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/
分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃
度達到100 萬/ml 左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20 分鐘
左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
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5.組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備
用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將
標本勻漿充分。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，
其余冷凍備用。

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