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細胞培養液主要成分介紹
點擊次數:2017 發布時間:2017-2-17
培養植物細胞要用組織培養液。不同植物要求不同。養動物細胞也有區分。如果養哺乳動物細胞一般需要小牛血清和特定的培養基。而且也需要CO2培養箱等設施。養酵母的話,一般的酵母發酵液就可以了。
實驗室常用的細胞培養液的主要成分是氨基酸、葡萄糖、無機鹽、維生素和微量元素等。為了維持穩定的pH,培養液中一般有一個pH緩沖系統,同時常加入少量的酚紅作為pH指示劑。另外培養液中一般需要加入一定量的血清。
培養液中的氨基酸除了13種細胞生長所必須的氨基酸外,往往加入一些非必需的氨基酸以促進細胞的生長。在必需的氨基酸中,L-*在溶液中不穩定(在4℃培養溶液中半衰期為3個星期,37℃中為1個星期),需要在使用時加入。
葡萄糖在培養液中的含量一般為1g/L(低糖)或4.5g/L(高糖)。它是細胞代謝重要的能量來源。
細胞培養液中都有一個平衡鹽系統,用于維持細胞的滲透壓、維持pH和細胞正常的代謝等。zui常用的平衡鹽系統有Dulbecco's phosphate buffered saline (D-PBS); Earle's balanced salts (EBSS) 和 Hanks' balanced salts (HBSS)。它們都含有細胞所必需的5種離子:鈉離子、鉀離子、鈣離子、鎂離子和磷酸根。培養液中的pH緩沖系統一般是*和HEPES等。培養液中的維生素包括*、維生素B、*和吡哆醇等。培養液中的微量元素元素包括Cu2+ ,Zn2+ ,和Mn2+等。血清中含有生長因子、促進細胞帖壁的因子、礦物質、激素、脂類等,另外血清可以抑制*的活性。
一般培養液都含酚紅作為pH指示劑,它是細胞培養液狀態的一個很好的標志。過長時間的培養或者微生物的污染都會使培養液的pH發生改變。需要注意的是,酚紅可以模擬類固醇激素(尤其是雌性激素)的作用,所以如果培養的細胞對雌性激素敏感(比如實驗本身就是研究雌性激素對細胞的作用),就應當使用沒有酚紅的培養液。