【中文名稱】：小鼠α半乳糖基抗原(α-Gal)ELISA 試劑盒
【英文名稱】： Mouse α-galactoyl,Gal ELISA Kit
【產品規格】:96T/48T
【保存條件】：2-8℃低溫保存
【保質期】：6個月，所有試劑盒均提供批次。
【試劑盒成分】：酶標板，試劑，標準品等。
檢測范圍：人、綿羊、小鼠、大鼠、豬、兔、山羊、牛、馬、豬、其它動物細胞因子、植物細胞因子、骨代謝、細胞凋亡、激素內分泌、活性多肽、肝纖維化、自身抗體、血栓與止血、腫瘤、自身抗體科研Elisa檢測試劑盒。
用于科研方面，不用于臨床診斷
ELISA是酶聯接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發展起來的一種免疫酶技術。此項技術自70年代初問世以來，發展十分迅速，目前已被廣泛用于生物學和醫學科學的許多領域。
原理
ELISA是以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應物，從而保證試驗結果的特異性與穩定性。在實際應用中，通過不同的設計，具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法(圖a)、用于檢測抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。
小鼠α半乳糖基抗原(α-Gal)ELISA 試劑盒
Elisa試劑盒酶免實驗為保證測定結果的準確性，請按照下列良好實驗室操作規范（GLP）進行實驗
1.要經常檢查酶標儀和微量轉移器的精度和準確度；
2.使用前，試劑儲存在2-8℃。
3.在進行分析操作之前，請將所有的試劑回溫到室溫（20-25℃）；
4。所有的 試劑在使用前，通過輕輕地翻轉搖動進行充分的混合，但不要引起泡沫；
5.實驗開始，所有的操作步驟應該在規定的時間內完成，不要中斷或超時；
6.實驗過程中注意保證溫度（20-25℃）；
7.不要將不同批次的試劑混用，不要使用過期的試劑；
8.每個樣品只能用自己的吸頭，不能混用，防止交叉感染；
9.所有的樣品和標志物必須同時使用，所有的實驗條件保持*；
10.按照實驗所需的量取用試劑，未用完的試劑不要倒回原瓶中；
11.所有的試劑瓶操作完成后立即蓋好蓋，不要將不同試劑瓶的蓋混蓋。
規格48Test/96Test
Elisa試劑盒 保存溫度：2-8C
實驗準備
- 嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
- 洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
- 消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。
- 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色，已經變藍的底物也不能使用。
- 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。
- 在儲存和溫育時避免強光直接照射。
- 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
- 任何反應試劑不能接觸漂白容劑或漂白溶劑所散發的強烈氣體。任何漂白成份都會破壞試劑盒中反應試劑 的生物活性。
- 不能使用過期產品。
- 如果可能傳播疾病，所有的樣品都應保管好，按照規定的程序處理樣品或檢測裝置。
試劑準備
試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡后方可使用。
- 標準品復溶：試劑盒提供6管標準品，沒管已標定濃度，并且凍干。試驗前在每個標準品管中加入0.5ml*，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動助其溶解，使其恢復為每個標準品管身標注的濃度。
- 20X洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1:20稀釋，即1份20X洗滌緩沖液加19份蒸餾水。
注意事項：
- 標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染，菌體中可能含有內源性HRP，也會產生假陽性反應。保存過久可發生聚合在ELISA中可使本底部加深。
- 凍結標本溶解后，蛋白質局部濃縮，分布不均，應充分混均宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混合，不要再混均器上強烈震蕩。
- 渾濁或有沉淀的標本應先離心或過濾，澄清后再檢測。
- 反復凍融會使蛋白效率降低，所以代測樣本如需保存做多次檢測，宜少量分裝冰存。
ELISA實驗標準曲線平直一般有以下原因：標準曲線制備是否不當，洗孔不凈，洗孔不充分讀數不準確或吸量有誤。查找原因，即可找到相應的解決方案。
操作步驟
- 從室溫平衡20分鐘后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
- 設置標準品孔和樣本孔，標準品孔哥加不同濃度的標準品50ul。
- 樣本孔中加入待測樣本50ul；空白孔不加.
- 除空白孔外標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100ul，用封板膜封住反應孔，37C水浴鍋或恒溫箱溫育60min.
- 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350ul）,靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此反復4-5次（也可用洗板機洗板）。
- 每孔加入底物A、B各50ul，15min內，在450nm波長處測定個孔的OD值。
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