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人混合系列蛋白激酶樣結構域(MLKL)ELISA 試劑盒

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更新時間:2017-05-22 02:51:41瀏覽次數:358次

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人混合系列蛋白激酶樣結構域(MLKL)ELISA 試劑盒

英文名 human mixed lineage kinase domain-like,MLKL ELISA Kit

      96T/48T

保存條件:2-8   

    :國產/進口

雙抗體夾心法

1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為110μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4 隔夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。

2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。

3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml37 孵育0.51小時,洗滌。

4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37 1030分鐘。

5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。

6. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

間接法

1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至110μg/ml,每孔加0.1ml,4℃隔夜;

2.次日洗滌3次;

3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,37孵育1小時,洗滌;

4.(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml

5.37孵育35-60分鐘,洗滌;

6.’zui后一遍用DDW洗滌。

其余步驟同雙抗體夾心法4、5、6。

 

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