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人γ干擾素(IFN-γ)實驗步驟說明

時間:2014-6-16閱讀:444
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人γ干擾素(IFN-γ)實驗步驟說明

1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10 孔,在*、第二孔中分別加標
準品100μl,然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二
孔中各取100μl 分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,
混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl 棄掉,再各取50μl 分別加到第五、第六孔
中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各
取50μl 分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混
勻后從第七、第八孔中分別取50μl 加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準
品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl 棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,
濃度分別為300ng/L,200ng/L ,100ng/L,50 ng/L, 25ng/L)。
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣
品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣
品zui終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混
勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液:將30(48T 的20 倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T 的20 倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此
重復5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止
液后15 分鐘以內進行。

人γ干擾素(IFN-γ)實驗步驟說明

試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R 值為0.95 以上。
2.批內與批見應分別小于9%和11%

人γ干擾素(IFN-γ)實驗步驟說明

亞硫酸鐵瓊脂
大鼠β血小板球蛋白/β血栓環蛋白(β-TG)ELISA定量試劑盒
兔兒茶酚胺(CA)ELISA定量試劑盒
小鼠膠質細胞系來源的神經營養因子(GDNF)ELISA定量試劑盒
葡萄糖半固體培養基
小鼠抗心肌抗體(AMA)ELISA定量試劑盒
腸道菌增菌肉湯
人潛伏膜蛋白1(LMP-1)ELISA定量試劑盒
人前列腺素D合成酶(PGDS)ELISA定量試劑盒
大鼠瘦素(LEP)ELISA定量試劑盒
小鼠雌激素(E)ELISA定量試劑盒
牛血小板活化因子(PAF)ELISA定量試劑盒
*麥康凱瓊脂基礎,250g培養基
葡萄糖瓊脂
產毒培養基,350ml培養基
人Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA定量試劑盒

人γ干擾素(IFN-γ)實驗步驟說明

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