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二氨氧化酶(DAO)說明書,豬Elisa試劑盒

時(shí)間:2014-3-5閱讀:534
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二氨氧化酶(DAO)說明書,豬Elisa試劑盒

小鼠二氨氧化酶(DAO)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書

 

本試劑盒用于測定小鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中二氨氧化酶(DAO)含量。

二氨氧化酶(DAO)說明書,豬Elisa試劑盒

密封袋    1個(gè)    1個(gè)
酶標(biāo)包被板    1×48    1×96
標(biāo)準(zhǔn)品:900U/L    0.5ml×1瓶    0.5ml×1瓶
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液    1.5ml×1瓶    1.5ml×1瓶
酶標(biāo)試劑    3 ml×1瓶    6 ml×1瓶
樣品稀釋液    3 ml×1瓶    6 ml×1瓶
顯色劑A液    3 ml×1瓶    6 ml×1瓶

二氨氧化酶(DAO)說明書,豬Elisa試劑盒

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠二氨氧化酶(DAO水平。用純化的小鼠二氨氧化酶(DAO抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入二氨氧化酶(DAO,再與HRP標(biāo)記的二氨氧化酶(DAO抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的二氨氧化酶(DAO呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠二氨氧化酶(DAO濃度。

血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。

3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBSPH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBSPH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8的溫度。加入一定量的PBSPH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

 

廣銳生物匯集Elisa試劑盒(種屬標(biāo)本:人、大鼠、小鼠、兔子、雞、豬、牛、豚鼠、犬、馬、猴、羊、各類植物等等)、標(biāo)準(zhǔn)品|對(duì)照品、抗體、培養(yǎng)基、試劑為一體的科研產(chǎn)品供應(yīng)商,國內(nèi)各省市地區(qū),擁有雄厚的實(shí)力、合理的價(jià)格和優(yōu)良的技術(shù)服務(wù),能夠及時(shí)解決和滿足客戶的各方面的需求,
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